酶与酶工程,纤维素酶的分离纯化.pptVIP

概念 纤维素是高等植物细胞壁的主要 成分，是由吡喃葡萄糖以β-1，4-糖 苷键连接而形成的线性大分子聚合 物。 纤维素酶是指能水解纤维素的β- 1，4-糖苷键，是纤维素降解为纤维 二糖和葡糖糖的一组酶的总称，是 由多个水解酶组成的复杂酶系。 纤维素酶的分离纯化 纤维素酶的组分大多为糖蛋白，工业上用于生 产纤维素酶的粗酶制剂常采用硫酸铵沉淀法，酒精 沉淀法，丹宁沉淀法和离心喷雾干燥等方法。但 在纤维素酶的分析研究上个常采用一些列的蛋白 质分离纯化技术，如分级沉淀法，色谱法， 凝胶过滤法等。 色谱法 ? 色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配 以固定相对流动相中的混合物进行洗脱，混合物 不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终 达到分离的效果。 ? 色谱法又称“色谱分析”、“色谱 分析法”、“层析法”是一种分离和分析方法??在 析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛 应用。 凝胶过滤 ? 凝胶过滤层析法又称排阻层析或分子筛方法，要是根据蛋白质的大小和形状，即蛋白质的质量进行分离和纯化。 层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多是交联的聚糖类物质，使蛋白质混合物中的物质按分子大小的不同进行分离。也叫做分子排阻层析。一种利用带孔凝胶珠作基质 ，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的 层析技术。一般是大分子先流出来??小分子后流 出来。 * * * 酶与酶工程 农学院生物技术系 姓名 组内职责 生物技术091班 第7组 2013年4月12 纤维素酶的概念及其性质 1 纤维素酶的来源 2 纤维素酶的分离提纯技术 3 纤维素酶的应用 4 纤维素酶的问题与展望 5 （一）分子量：45000-76000；最适pH：pH4-5；最适温度：40-60℃ 。 （二）纤维素酶各组分大多为糖蛋白。 （三）纤维素酶是诱导酶，诱导物为纤维二糖。 纤维素酶的分子结构 纤维素酶 目前研究较多的是霉菌，其中酶活力较强的菌种为木霉、曲霉、根霉和青霉，特别是里斯木霉、绿色木霉、康氏木霉等较为典型，是目前公认的较好的纤维素酶生产菌。 真菌 原生动物 细菌 软体动物 放线菌 纤维素酶 昆虫 沉淀法（盐析） ?盐析沉淀法的原理： 高盐浓度下盐离子与酶蛋白质分子争夺水分 子，除去蛋白质的水合外壳， 降低溶解度而沉淀。 通常采用的中性盐有 硫酸铵、硫酸钠、硫酸 钾、硫酸镁、氯化钠和磷 酸钠等。 纤维素酶 应用 食品工业 饲料工业 水产业 洗涤剂工业 纺织工业 其他 纤维素酶在食品工业应用极为广泛。 如将纤维素酶应用于豆腐生产工艺中，结果表明，在大豆浸渍时添加0.5%~5.0%纤维素酶，可提高4.00%~11.01%豆腐品率，且所产豆腐色质和风味无明显变化，同时不改变原有生产工艺路线，其经济效益比较明显 。 在饲料中添加纤维素酶后，喂幼鸡、仔猪及一般虚弱动物时，喂养效果明显，喂蛋鸡可提高产卵量，喂乳牛时，不仅可以使体重增加，而且提高产乳量。 鱼虾类不具备分泌纤维素分解酶的能力，不能直接利用粗纤维，但是鱼虾类饲料中含有适量的粗纤维是维持消化道正常功能所必需的。适量的纤维素能促进肠道蠕动，刺激消化酶的分泌，扩大食物团与消化酶的接触面。研究表明，饲料中纤维素还有降低血清胆固醇的作用。 天然纤维如棉、麻等纺织品具有较强的吸湿、透气性，备受消毒者青睐。但棉、麻及其混纺布料上存在细毛，与皮肤接触时会产生刺痒感，因此近几年来，利用纤维素酶进行生物整理越来越受到纺织界的重视。利用纤维素酶进行酶处理，能使麻、棉表面剥离和纵向复合细胞间层侵蚀，使纤维梢丝束化或脱落，能极大地降低对皮肤的刺痒，提高棉麻织物的服用性能及产品档次。 纤维素酶在造纸、地质钻井、草药提取等 方面均有很大应用潜力。用纤维素酶适当处理纸 浆，能增加微细纤维生成量和提高保水度，有可 能促进某些纸张抗张力提高。此外，纤维素酶还 应用于医药行业制消化剂等。 * *