常用试剂的配制课件.doc

常用溶液的配制 信息来源：生物谷　更新时间：2004-12-21 1:33:00 一、常规溶液 (一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS) 甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液 Na2HPO4 ?????????????????? 9.465g 蒸馏水????????? ??????????加至1000ml 乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液 KH2P04???????????????????? 9.07g 蒸馏水??????????????????? 加至1000m1 分装在棕色瓶内，于4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH ? 甲液ml ? 乙液mI ??? pH ? 甲液ml ? 乙液mI ??? 5.29 ??? 5.59 ??? 5.91 ??? 6.24 ??? 6.47 ??? 6.64 ??? 2.5??? 5.0 ??? 10.0 ??? 20.0 ??? 30.0 ??? 40.0 ??? 97.5 ??? 95.0 ??? 90.0 ??? 80.0 ??? 70.0 ??? 60.0 ??? 6.81 ??? 6.98 ??? 7.17 ??? 7.38 ??? 7.73 ??? 8.04 ??? 50.0 ??? 60.0 ??? 70.0 ??? 80.0 ??? 90.0 ??? 95.0 ??? 50.0 ??? 40.0 ??? 30.0 ??? 20.0 ??? 10.0 ??? 5.0 ? ??? (二)0.3％台盼兰染液 ??? 称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。 ??? (三)0.5％酚红指示剂 ??? 酚红????????????????????? 0.5g 0.1N(0.4％)NaOH?????????? 15ml ??? 双蒸水??????????????????? 85ml ??? 将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。 ??? (四)5.6％NaHCO3溶液 ??? 称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4冰箱保存) ??? (五)10μg／ml秋水仙素 ??? 秋水仙素??????????????????? lOmg 生理盐水??????????????????? 100ml 装入茶色瓶中，为贮备液，4冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。 ??? (六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液 ??? 将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。 ??? (七)2％柠檬酸钠 ??? 称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。 ?? （八）0.2％次甲基兰染液 ??? 称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。 ??? (九)0.5％醋酸洋红(Aceio Carmine)染液 ??? 洋红??????????????????? lg ??? 醋酸??????????????????? 90ml ??? 蒸馏水??????????? ??????110ml ??? 将90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴，直到呈葡萄酒色。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放时间越长效果越好，室温保存。 ??? (十)1％甲苯胺兰(Toluidine blue) ??? 称取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。 ??? (十一)1/3000中性红染液 ??? 取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。 ??? (十二)Giemsa染液 ??? 1．贮备液 Giemsa粉??????????????????? 1g ??????? 纯甘油?????????????????????? 66ml ??????? 甲醇???????????????????????? 66ml ??? 先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。 ??? 2．工作液 ??? 临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。 ??? (十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液 ??? 苏木精