核孔的材料.doc

核孔的物质进出 核通过一个有双层膜的外被与胞质分隔。内膜与核纤层接触，为核提供了一个表面的膜。外膜与胞质中的内质网连接。这双层膜在被称为核孔复合物(Nuclear pore comlex)的开口处接触。每个复合物的中心都是一个孔，为胞质和核之间提供一个亲水的通道。这就意味着核与胞质具有相同的离子环境。在一个动物细胞的核外被上有~3000个核孔复合物。 核与胞质间的运输以两个方向进行。由于所有的蛋白质都在胞质中合成，所以核内需要的蛋白质必须从胞质转运。因为所有的RNA 都在核内合成，所以胞质所有的RNA(mRNA、rRNA、tRNA 和其他的小RNAs)必须由核内运出。核孔负责物质的输入及输出。 组蛋白是染色质的主要成分，通过它可以了解核孔输入的体积。在分裂细胞中，在DNA 合成期间必须有足够的组蛋白输入到核内与二倍染色体结合。由于组蛋白大约占染色质蛋白质含量的一半，所以我们可以得出结论，每个核孔每分钟必须转运进大约200个染色质蛋白质分子。 对这一过程的不了解以及mRNA 的不稳定使计算mRNA 输出的分子数更加困难，但是每个细胞中的~250,000 个分子的mRNA 很可能需要每个核孔每分钟发生~1 次这样的事件。核内主要合成rRNA，它以组装成核糖体亚基的形式输出。在一个细胞周期中要使核糖体的数量增加一倍，在每个核孔每分钟转运出~5 个核糖体亚基( 60S和40S)。 核糖体蛋白质首先必须被转运进入核内才能与rRNA结合。所以核糖体蛋白质在进入核内时以游离蛋白质的形式进入，而在输出时以装配好的核糖体亚基的形式输出。每个核糖体有~80 种蛋白质，它们的体积可能与染色质蛋白质的体积相近。 核孔是怎样使有不同大小、不同特点的物质以两个方向转运的呢？用显微镜观察时，发现核孔复合物有相同的形式。用去污剂可使核孔从核上释放出来，它是一个环状结构，包括由8 个轮辐(Spokes)组成的纤毛漏斗结构。8-重对称的基础包括中心结构，周围的辐射臂及内部的转运子。这样的核孔复合物在外部具有一个直径为~120nm 的环。这个环本身含有8个亚基。环外的8个辐射臂可能负责将核孔复合物锚定在核的外被；它们穿过膜。8 个内部的辐从环上伸出，将孔的直径缩小到~48nm。在这个区域以内是转运子，包含一个接近直径小于10nm的圆柱体的孔。 核孔提供了一个穿过核外被中外膜和内膜的通道。侧面以一个与核外被在一个平面的水平轴两折对称。存在外膜和内膜的连接环，包括伸入到胞质和核内的表面，后两者形成中心环(侧面只能看到8 个辐中的2 个)，辐相对于水平轴对称。中心的孔突出，有时在孔内可以看到转运的物质，但不能将这些现象与特定物质的转运等同起来。 核孔复合物的大小同总的分子量100×106相对应(与80S 核糖体4×106比较)。8重对称模型和2重对称模型可以辨认出最小重复的成分。这将支架结构分为16 个单元，即每个~6×106 道尔顿。每个单元都必定包含大量独立的蛋白质。中心孔径只是整个复合物的一小部分。 化合物自由穿过核孔的能力受它们大小的限制，为了方便将物质按大小分为三类： ·小于5000 道尔顿的分子注射到胞质后立刻在核内出现：我们可以下结论，核外被对于离子、核苷酸和其他小分子是自由通透的。 ·5-50KD 蛋白质的扩散因其大小而异，这主要是由与核孔的随机接触、穿过的过程决定的。注射的蛋白质需要几个小时才能使胞质与核内的水平达到一致。我们可以下结论，小蛋白质通过被动扩散(Passive diffusion)进入核内(但它们也可以被主动运输)。核外被事实上提供了一个能使小于50kD 的物质进入的筛孔或分子筛(Molecular sieve )。 ·大于50kD 的蛋白质不通过被动运输进入核内；它们的转运需要主动运输(Activetransport)。 核孔中类似栅格的结构说明大蛋白质的主动运输和小蛋白质的被动运输是由不同的特点决定的。辐间的孔隙即在外环和内环之间的外周形成8个通道。这是一个刚性的结构。它们是圆形的，直径是~10nm。我们推测这为小蛋白质的被动扩散提供了一个分子筛。一个分子量为50kD 的球形蛋白质如果是完整的，直径就会为~5nm。扩散需要被转运的物质要比筛孔小。 如果通道允许自由的转运，则小于限制体积的物质浓度会在核内和胞质之间达到平衡(尽管，当物质的大小接近筛孔时，平衡会变慢)。以这种方式进入核内的蛋白质会滞留在核内，如果它们参与核的一些功能就会积累在核内。例如，如果一个蛋白质整合到一个大的结构例如染色体中，就会使平衡发生改变，从而推动更多的蛋白质进入核内。 中心的孔径用来转运大的物质。通过中心孔的转运需要特定的信号。小的蛋白质也可能通过这种方式转运(也通过外周通道转运)，大的蛋白质必须使用