检查血吸虫病的粪便.doc

血吸虫病的粪便检查 血吸虫病的诊断，一般可分为临床诊断和实验诊断。临床诊断是根据病史、症状和体征作出初步诊断，但不能确诊病人。实验诊断包括病原学诊断和免疫学诊断。血吸虫病的病原学诊断有粪便检查和活组织检查两种，若在受检者的粪便或活组织中查见虫卵或毛蚴，即可诊断为血吸虫病人。血吸虫病的粪便检查有镜检法检查虫卵，孵化法检查毛蚴，也有孵化结合沉渣镜检。由于孵化法取用的粪便量多，在粪内只要有少数活虫卵就能查见，检出率比较高。孵化后的沉渣镜检，能检出部分孵化检漏的病人，能进一步提高检出率，孵化结合镜检是目前血吸虫病粪便检查的主要方法。 一、病原学诊断的理论基础 寄生在血管里的血吸虫为何能在粪便中查到虫卵?先从血吸虫产卵及虫卵分布讲起。雌雄合抱的成虫寄生在人或哺乳动物的肠系膜静脉内产卵，雌虫在寄生期间的排卵能力可有变化。如小鼠感染日本血吸虫（大陆株）后26～33d，每条雌虫日平均产卵150个，34d为664个，44d为时达2092个，58d为929个，68d为370个卵。雌虫产出的虫卵大部分沉积在肠和肝等组织，仅小部分卵可随粪便排出体外。如小鼠感染大陆株日本血吸虫44d产卵最多时（2092个/日）分布于大肠、肝、小肠、自粪便排出和其它组织虫卵的比例为50.5%、22.5%、18.3%、7.7%及1%。又如用山梨株日本血吸虫尾蚴感染ddy小鼠4～15wk观察，平均每条雌虫每天产卵2100个。到15wk时，从粪便排出的累计虫卵数占总产卵的28.2%；组织内虫卵以小肠为主，占沉积虫卵数83.2%，而肝内为15.5%。表明，同一种血吸虫的不同地域株和不同宿主，雌虫产出的虫卵在组织内的分布及排出体外的数量不尽相同。 刚从雌虫产出的虫卵为单细胞卵，含1个受精卵和20个（16～30个）卵黄细胞，在组织内经10～11d发育成熟（含毛蚴卵），成熟卵在组织内成活时间约为11d。因此，日本血吸虫卵自产出、发育成熟到死亡约经21～22d。 血吸虫卵从血管中通过肠壁（日本、曼氏血吸虫）或膀胱（埃及血吸虫）等组织释放到肠腔或膀胱腔中，然后随粪便或尿液排出，我们即可取粪便或尿液作病原学检查。但其机理尚未很好了解，一般认为涉及很多因素：虫卵的刺、血流的压力、肠蠕动以及毛蚴分泌的蛋白质酶等。其实，首要的应是随着虫卵中毛蚴的发育成熟，在虫卵周围形成病变，这是必要条件。所以排至外界的虫卵大多是含活动毛蚴的成熟卵。成熟卵在合适的条件下可脱壳而出。因此，从粪便内检查毛蚴，即毛蚴孵化法为日本血吸虫特有的诊断技术。 二、尼龙绢袋集卵孵化法 曾采用的孵化法有量杯烧瓶沉淀孵化法、塑料杯顶管孵化法、尼龙绢袋集卵孵化法等。尼龙绢袋集卵孵化法有下列优点：（1）毛蚴计数高；（2）用水量少，可减少劳动力；（3）由于不需换水，可缩短操作时间，2—3min即可入瓶孵化；（4）器材轻巧，携带方便。为此，我们确定采用尼龙绢袋集卵孵化法。 （一）毛蚴孵化的条件 成熟的血吸虫卵有机会落入自然界水体中，条件适合时，卵内毛蚴活动增强，在卵内不停地转动，最终破壳而出，在水体中游动，这一过程称孵化。毛蚴从卵内逸出的时间非常迅速，仅0.1～0.3s。日本血吸虫卵孵化时卵壳大多数呈纵裂，毛蚴迅速从纵向裂口逸出。 1、渗透压 一般认为介质的低渗透压作用是血吸虫卵孵化的主要因素。成熟血吸虫卵在血液、肠内容物或尿液中是不能孵化的，仅被淡水稀释之后才能孵出毛蚴。粪便中的日本血吸虫卵需待粪液被稀释至一定混浊度以下始能孵化。研究证明，在0.7～0.9%氯化钠溶液中，大多数日本血吸虫卵的孵化被抑制，1.2%及其以上浓度全部虫卵不能孵化。0.8%氯化钠溶液的渗透压相当于4.0大气压（表1）。 ? 表1? 日本血吸虫卵在氯化钠溶液中一天的孵化力（温度20℃） 氯化钠溶 液浓度（%） 未孵化 虫卵数 孵? 化 虫卵数 孵化率 （%） 渗透压 （大气压） 1.0 84 ? 3 ?3.4 4.1 0.8 87 ? 1 ?1.1 3.3 0.6 76 ?20 20.8 2.5 0.4 34 ?45 57.0 1.7 0.2 30 ?46 60.5 0.8 对照 19 116 85.9 — （okamoto，1962） 若以清水中的虫卵孵化率为100%，而在0.2%氯化钠溶液中虫卵的孵化率不减，在0.5%溶液中孵化率降为60%，在0.8%中降至7.5%，在1.0%中降至1.8%，未孵出毛蚴的虫卵在当时看来还是活的。 2、温度 温度是促使毛蚴孵化的必要条件，25℃左右是血吸虫毛蚴孵化的适宜温度，低于10℃或高于37℃，大多数虫卵的孵化受抑制。一般是温度愈高，孵化愈快，毛蚴寿命也愈短（表2） ? 表2? 不同月份平均温度下日本血吸虫毛蚴孵化起讫时间 月份 气温 （℃） 水温 （℃） 开始孵化时间（h） 毛蚴最多时间（h） 毛蚴消失时间（h） ?1 ?