第11章糖分析.pptVIP

糖的分析;一、糖的概念;糖类的主要生物学作用;（二）糖的化学本质;（三） 糖结构的测定;测定方法;6.1 糖的结构; 单糖的命名： 普遍以来源命名，如果糖、木糖、和葡萄糖。其中以五碳糖和六碳糖最为重要。;D-2-脱氧核糖;淀粉 直链淀粉 分子量约1万-200万，250-260个葡萄糖分子，以?（1?4）糖苷键聚合而成。呈螺旋结构，遇碘显紫蓝色。 支链淀粉中除了?（1?4）糖苷键构成糖链以外，在支点处存在?（1?6）糖苷键，分子量较高。遇碘显紫红色。;6.2 糖的化学分析法;在严格控制实验条件的情况下， Cu2O生成量的多少可以作为糖量多少的定量指标。 Cu2O的量可以通过其还原磷钼酸到深蓝色钼蓝进行定量，其吸收波长在700～750nm。 ;醛糖和酮糖与芳香胺的反应 醛糖和酮糖在冰乙酸中与不同的芳香胺发生缩合反应生成有色物质。 常用的芳香胺有邻茴香胺、对氨基水杨酸、对氨基苯甲酸、二苯胺和对氨基苯酚等。 芳香胺类化合物对于某一种或者某一类的糖的反应具有选择性。 但是芳香胺类化合物具有致癌性不适合于实验室使用。;与强酸和酚的反应： 戊糖和己糖与强酸和酚一起加热，反应时会分别产生呋喃或羟甲基呋喃衍生物，醛基然后与酚缩合产生有颜色的化合物;糖 糠醛或糠醛衍生物 紫色 ;己酮糖 羟甲基糠醛 红色 ;6.2.2 多糖的结构分析;过氧化反应 糖类被强氧化剂如高碘酸氧化时，碳链会发生断裂 ;质谱分析法： 关键问题是离子化：快原子轰击（FAB)、电喷雾离子化（ESI)和基体协助激光解吸离子化（MALDI)软电离技术都适用于糖类分析。 飞行时间质谱（TOF-MS)和傅立叶变换质谱（FT-MS)测大分子糖的分子量要比光散射法或凝胶渗透法精度高得多，特别是LC/MS和MS/MS分析法更有用。;;步骤 酶降解糖复合物，切割寡糖链； HPLC分离纯化 质谱分析 得出结论后，用其他方法核证，如GC/MS,MS/MS和NMR等;6.3 糖的酶法分析;6.3.1 基于葡萄糖氧化酶的葡萄糖分析;基于显色反应的过氧化氢分析 上述反应所产生的过氧化氢可以用显色法测定，最早用的底物为邻-连甲苯胺和邻-茴香胺，但是具有致癌性，已被取代。 但是要注意避免过氧化物酶的干扰，它可以使过氧???氢变为水和氧气。 基于电化学的过氧化氢分析 是葡萄糖分析仪的基础 分析速度快，一分钟之内就可以完成，而且试剂及样品的消耗少（10μl）。;6.3.2 基于葡萄糖脱氢酶或己糖激酶的葡萄糖分析法;;6.3.3 其他己糖分析方法;6.4 糖混合物的分离鉴定;6.4.1 纸色谱及薄层色谱;6.4.2 气相色谱法;?1·阿拉伯糖arabinose;2.半乳糖galactose;3.葡萄糖glucose;4.甘露糖mannose;6.4.3 高效液相色谱;6.4.4 高效毛细管电泳法（HPCE);展 望