生物技术引论和实践教材.docVIP

生物技术引论与实践 新疆农业大学农学院生物技术系 2011年8月 前 言 现代生物技术是以生命科学为基础，利用生物（或生物组织、细胞及其他组成部分）的特性和功能，设计、构建具有预期性能的新物质或新品系，以及与工程原理相结合，加工生产产品或提供服务的综合性技术。包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术、发酵工程等。这门技术内涵十分丰富它涉及到：对生物的遗传基因进行改造或重组，并使重组基因在细胞内表达，产生人类需要的新物质的基因操作技术（如“克隆技术”）；从简单普通的原料出发，设计最佳路线，选择适当的酶，合成所需功能产品的生物分子工程技术：利用生物细胞大量加工、制造产品的生物生产技术等等。 从生物技术的发展来看现在已经深入到我们社会生产和生活的很多领域里，这是生物学发展的必然趋势。现代生物技术日益应用到社会生产的各行业中，农业生产中的繁殖控制技术、动、植物育种、农作物病虫害的综合防治、动物疫病的控制、绿色食品的生产；工业生产中生物催化制造、生物技术药物和疫苗生产等都广泛的采用了现代生物技术。所以，现代生物技术的范围已经覆盖了生物类专业的各个领域，对于生命科学类专业的学生，掌握现代生物技术的原理和实践，具有现代生物技术应用必备的专业理论知识和较熟练的综合技能，才能成为适应生物技术生产、技术服务及相关专业第一线需要的高技能人才。 本教材正是在上述背景下编写的，旨在提高生命科学类专业学生的生物技术理论知识和实践技能。本教材以现代生物技术的核心“基因工程技术”为主要内容；以试验设计的整体性，连贯性为主要出发点；各试验之间即独立又相互联系，前一个实验的结果又是后一个实验的材料，使学生在掌握基础理论和技术的同时，树立全面、整体的试验观念。其中实验一到实验十二是核心实验内容，包括了以大肠杆菌为代表的微生物实验技术、基因克隆技术、基因表达技术和蛋白质研究技术，且各实验相互连续，构成一个整体。后续的实验是现代生物技术的相关技术，包括动、植物转基因技术，分子标记技术、分子检测技术以及生物信息学研究方法，可根据专业不同选择开设。 本教材是由新疆农业大学多年从事植物生物技术、动物生物技术的教师共同编写而成，所有参与教材编写的老师都认真负责的编写各自的章节，为教材保质保量的完成做出了重要贡献，在此深表感谢。由于现代生物技术的发展十分迅速，编者虽尽力吸收各方面的研究材料，但限于作者水平，纰漏之处在所难免，希望读者不吝惠予指正。 目 录 （实验教材编写分工） 实验一：大肠杆菌液体培养基和固体筛选培养基制备 顾爱星 实验二：大肠杆菌工程菌平板培养 顾爱星 实验三：PCR扩增目的基因片段 葛 杰 实验四：回收目的基因片段与载体连接 张 桦 实验五：大肠杆菌液体培养 罗 明 实验六：大肠杆菌感受态细胞制备及转化 罗 明 实验七：筛选重组转化菌落 张 桦 实验八：菌液PCR分析 葛 杰 实验九：提取大肠杆菌重组质粒DNA和酶切分析 张 桦 实验十：培养工程菌诱导外源基因表达 王希东 实验十一：蛋白质分离纯化技术 王希东 实验十二：SDS检测外源基因的表达 王希东 实验一 大肠杆菌液体培养基和固体筛选培养基制备 一、实验目的 1．了解培养基制备的基本原理，掌握培养基制备的方法和步骤。 2．了解灭菌的基本原理，学习并掌握实验室常用的灭菌方法。 二、实验原理 1．培养基按物理状态分为：液体、固体、半固体三种。 （1）液体培养基：不含任何凝固剂。 （2）固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂，通常1.5～2.0％琼脂，从海藻（石花菜）中提取得到的多糖，融化温度95℃，凝固温度45℃ （