海参体壁及消化道氨基酸与脂肪酸分析2.doc

海参体壁及消化道的氨基酸和脂肪酸分析* 向怡卉,苏秀榕, 董明敏 （宁波大学 生命科学与生物工程学院,宁波 浙江 315211） 摘 要：为了进一步开发利用海参资源，本文用氨基酸自动分析仪和气相色谱仪测定海参体壁及海参消化道中氨基酸、脂肪酸的组成和含量。结果表明：海参体壁及消化道中都含有18种氨基酸，分别占体壁干粉重的37.23％、消化道湿重的7.96％，其中都含有8种必需氨基酸，分别占总氨基酸的31.02％和41.81%；体壁及消化道中脂肪酸分别是19种和21种，其总量为12.931 mg/g(干重)、5.782 mg/g（湿重）。消化道中同时含有DHA和EPA，且EPA的含量最高，达17.36%。 关键词：海参 ；氨基酸；脂肪酸 中图分类号： 海参为棘皮动物门（Echinodermata）海参纲（Holothurioider）动物的总称，海参纲下设3亚纲、6目和 24科[1] 。海参几乎全部生活于海洋,以印度—西太平洋区种类最多,食用海参大多分布在热带珊瑚礁内[2]。全世界共有1100种,约40种大型体壁较厚的海参可供食用。我国己鉴定的海参达134种，占全球海参总种数的14.9%左右，可食用的仅有20多种[3]。海参肉质酥脆，香软滑润，高蛋白质，低脂肪，不含胆固醇，有多种氨基酸、酸性多糖、维生素和锌、铁、钙、硒、碘等人体普遍缺乏的多种微量元素[8]，营养全面且味道鲜美。海参体内还含有丰富的生理活性物质,如海参毒素、海参多糖、海参皂苷、多肽、海参神经苷酯、甾醇等，这些生理活性物质具有抗肿瘤、抗凝血、镇痛、提高免疫力、抗真菌、降血脂、防治类风湿关节炎、关节强硬性脊椎炎和骨性关节炎等作用[1]。在海参食用中废弃的海参消化道具有很高的营养价值，同时还有一定医疗效果,消化道中含有12个PPm的钒元素，钒是一种痕迹元素，可以阻止人体脂质代谢，抑制胆固醇的合成[9]。目前关于海参消化道的营养成分国内尚未见报道。本文测定了海参体壁和海参消化道的氨基酸和脂肪酸含量，并对体壁、消化道的食用和药用价值做了进一步的探讨，旨在引导海参市场的科学消费,并为海参体壁及消化道营养、保健价值的研究及其相关产品的开发应用提供依据。 1 材料与方法 1.1材料 2004年12月取于大连棒锤岛海参有限公司，品种为刺参（Stichopus japonicus Selenka）。将3条长27 cm和2条长23cm的活刺参用蒸馏水冲洗后解剖取出内脏。体壁烘干备用，消化道装于干净离心管中备用。 1.2 方法 1.2.1 氨基酸分析 除色氨酸的之外其他氨基酸都用贝克曼System 6300氨基酸分析仪进行测定。 样品处理：精密称定样品约100 mg，置于180×18mm试管中，加6 mol/L盐酸10 ml,真空封管，110℃下水解24 hr，过滤定容500 ml，取一定量的水解液经真空干燥除去盐酸，加去离子水再蒸干，重复两次。 色谱柱为贝克曼Sytem 6300专用的钠离子交换色谱柱。 *浙江省回国人才基金资助项目 作者：向怡卉，女，1981.1，硕士，E-mail:xiangyihui@， **通讯作者：苏秀榕，研究员，硕士生导师，研究方向：生物活性物质与功能食品 E-mail:suxiurong@ 色氨酸采用高效液相色谱法测定 分析条件：LC-4A高效液相色谱仪，荧光检测器，ZorbaxODS (4.6 mm×25 cm) 色谱柱； 流动相：5 mol /L高氯酸和甲醇的混合液（92:8），流量：1.0 ml / min；荧光激发波长：285 nm；荧光发射波长：348 nm；温度：色谱柱50℃。 1.2.2 粗脂肪测定：采用粗脂肪自动测定仪。 1.2.3 脂肪酸分析 样品处理：样品加氢氧化钠甲醇溶液30 ml，在85℃的水浴上回流1.5 hr，用6N HCl调至酸性，80℃左右的水浴上加热0.5 hr，倾入分液漏斗中，用正己烷萃取两次，用去离子水洗涤两次，加入无水硫酸钠干燥过夜，在80℃水浴上蒸去大部分溶剂，再在95℃水浴上除溶剂，冷却后，加入2 ml 30%三氯化硼乙醚络和物溶液，在80℃的水浴上回流0.5 hr，冷却后，加入2 ml石油醚。取上层醚样1 ul进行GC分析。 气相色谱分析条件：采用PEG-20M石英毛细管分析柱（30 m×0.32 mm×0.5μm）； 检测器：氢火焰离子化检测器FID；柱温：200℃；进样器：240℃；分流比：1:100；采用外标法进行定量分析，标准脂肪酸和碳数分布规律相结合进行定性分析。 2 结果与讨论 2.1海参体壁及消化道中氨基酸的组成和分析 表1 海参体壁及消化道的氨基酸组成及含量 氨基酸 缩写 体壁（g/100g，干重） 消化道（g/100g，湿重） 胱氨酸c 组氨酸 甲硫