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1.紫外可见分光光度法 11 概述 物质的吸收光谱本质上就是物质中的
1.紫外可见分光光度法 1.1 概述
? ??物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。? ??紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。即物质在一定波长的吸光度与它的吸收介质的厚度和吸光物质的浓度呈正比。? ??当分子中含有一个或更多的生色基团(即具有不饱和键的原子基团),辐射就会引起分子中电子能量的改变。常见的生色团有: ? ??如果两个生色团之间只隔一个碳原子,则形成共轭基团,会使吸收带移向较长的波长处(即红移),且吸收带的强度显著增加。当分子中含有助色基团(有未共用电子对的基团)时,也会产生红移效应。常见的助色基团有:-OH, -NH2, -SH, -Cl, -Br, -I。? ??紫外可见分光光度法从问世以来,在应用方面有了很大的发展,尤其是在相关学科发展的基础上,促使分光光度计仪器的不断创新,功能更加齐全,使得光度法的应用更拓宽了范围。目前,分光光度法已为工农业各个部门和科学研究的各个领域所广泛采用,成为人们从事生产和科研的有力测试手段。我国在分析化学领域有着坚实的基础,在分光光度分析方法和仪器的制造方面在国际上都已达到一定的水平。 1.2 特点
? ??分光光度法对于分析人员来说,可以说是最有用的工具之一。几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。分光光度法的主要特点为:? ??(1) 应用广泛? ??由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
注:图内实线圈内的元素可用直接法测定,虚线圈内的元素可用间接法测定。带A 的表示与环境污染有关的元素。其中放射性元素只有铀和钍常用光度法测定,其它元素都采用放射性分析测量。
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? ??在国际上发表的有关分析的论文总数中,光度法约占28%,我国约占所发表论文总数的33%。由于各种各样的无机物和有机物在紫外-可见区域都有吸收,因此均可借此方法加以测定。到目前为止,几乎周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性气体外)均可采用本法测定。美国水和废水标准检验方法中光度法占37.4%,我国水和废水监测分析方法中光度法占35.0%。上世纪六十年代初,分光光度分析在整个分析方法中所占比重约为45%,在我国1983-1992十年间发表的无机分析文献中光度分析论文占26-30%,在我国岩矿部门,光度法完成了约1/3的岩矿分析任务。在国际上,将1985-1989年分析仪器的世界销售额按31大类进行分类统计,其中UV – VIS分光光度计一直占有5 - 6%的份额,排名第五。由于光度计的价格相对比较低廉,故若以仪器销售的台数技术的话,则分光光度计将排在第二位。仪器的销售情况可以从侧面反映各类分析仪器在实际使用中的广泛和频繁程度。? ??分光光度计作为检测器与其它分析仪器联机,以完成经前处理后的测量,这又扩充了光度计的应用范围。例如,在二十世纪七十年代以后兴起的流动注射分析法中,就有约2/3是和光度计联机进行检测的。流动注射分析具有反应时间和混合状态高度重现的特点,它并不要求化学反应达到平衡,即使试剂或化学反应不稳定仍能得到良好的效果。分光光度计又是高效液相色谱中应用最为广泛的检测器,八十年代出现的光二极管阵列检测器能在几毫秒的瞬间获得流动池中组分的的吸收光谱,可解决色谱技术中定性的困难。将光度计与积分球装置连接,可组成反射光谱测量系统,用于固体表面物理光学特征测试。光导纤维传感器与光度计联用,是由光度计引出两支光纤导管,一支将入射光送入,光束通过液池,透射光经第二支光纤送回到分光光度计进行光度分析。这类光导纤维- UV – VIS光度计的光纤探头可以做得很小,可直接插入活体组织作长时间连续监测,进行临床检验,光纤本身又是绝缘的,探头可置于高电压、强磁场、强放射性等恶劣环境中,进行遥测。
(2) 灵敏度高? ??由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但
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