14—3—3γ和ζ蛋白在小胶质细胞中表达变化的研究.pdfVIP

· 352· 中国老年学杂志2o08年2月第28卷 5 Szabo C，Salzman AL Endogenous peroxynitrite is involved in the inhibi— 9 Van Snick J．Interleukin-6：aIl overview[J]．Annu Rev Immunol，1990； tion of mitoehondrial respiration in immuno—stimulated J774．2 maeropha— 8：253-78． ges[J]．Biechem Biophys Res Commun，1995；209：739-43． 10 苗明三，方晓燕，杨 云，等．山茱萸多糖免疫兴奋作用的研究 6 Utsuyama M，Hirokawa K，Kurashima C，et a1．Differential age—change in [J]．河南中医，2002；22(3)：24-5． the numbers ofCD4 CD45fLA and CD4 CD29 T cell subsetsin hu— 11 苗明三，杨 云．山茱萸多糖抗氧化作用研究[J]．河南中医 man peripheral blood[J]．Mech Ageing Dev，1992；63(1)：57-68． 2002；22(1)：66-7． 7 段震锋，王东升．老年人白细胞介素2及其受体的研究[J]．中华老 12 欧 芹，王雅丽，魏晓东，等．山茱萸多糖对HDF细胞B一半乳糖苷 年学杂志1993；12(3)：l65-7． 酶及p16表达的影响[J]．中国老年学杂志，2007；27(4)：325-7． 8 Chaudhrie G，Clark LA，Hunt NH，et a1．Effect of antioxidants on primary [2006—10-21收稿 2008-01 修回] alloantigen induced T cell activation and proliferation[J]．J Immunol， (编辑 胡国义) 1986；137(8)：2646-52． 14—3—3^y和∈蛋白在小胶质细胞中表达变化的研究 何 静 孙圣刚 陈小武 (华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科，湖北 武汉 430060) [摘 要] 目的 了解14-3-3和‘蛋白在中枢神经系统小胶质细胞中的表达及脂多糖(I )刺激后其表达变化情况，探讨14-3-3蛋白与小胶 质细胞释放炎症因子的关系。方法 应用小鼠小胶质细胞株BV-2作为体外小胶质细胞的模型，以LPS刺激其活化，应用免疫荧光、流式细胞术检测 14—3-3~t和‘蛋白在刺激前后的表达变化，ELISA检测TNF—q的表达。结果 小鼠小胶质细胞株BV-2在未刺激状态下表达l4—3—3^y和‘蛋白；LPS刺 激细胞活化后释放TNF-a，同时14~-3T和∈蛋白表达下降。结论 正常小鼠小胶质细胞高表达14-3-3T和∈蛋白，LPS刺激后表达下降，提示其参与 了中枢神经系统免疫应答的调节。 [关键词] l4-3—3蛋白；小神经胶质细胞；脂多糖(LPS)；肿瘤坏死因子(TNF) [中图分类号] R392 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9202(2008)04-0352-03 帕金森病(PD)是一种多发于老年期的中枢神经系统退变 1 材料与方法 性疾病。小胶质细胞在中脑黑质致密部分布密度明显高于其 1．1 主要材料及试剂 小胶质细胞(BV-2)购于中国协和医 他脑区，与PD的发病密切相关；在PD患者脑中，激活的小胶 科大学细胞中心，脂多糖(LPS)，E．coli 026B6购于Sigma公司， 质细胞释放大量的致炎性因子(TNF．d，IL-1B，IFN． 等)，一氧 高糖DMEM培养基(Gibco公司)，胎牛血清(武汉三利)，14．3-3 化氮(NO)，活性氧产物(ROS)和花生四烯酸代谢产物对多巴 蛋白多克隆抗体(Santa Cruz Biotechnologies)，荧光二抗 FITC 胺能神经元产生毒性作用，并