大肠细菌的基因芯片的鉴定.pptVIP

实验三基因芯片鉴定大肠细菌; 基因芯片： 是指将特定的DNA或寡聚核苷酸片段通过物理化学方法固定于玻璃、尼龙甚至塑料片上,使多基因分析可同时进行的一种装置。 基因芯片上可固定不同物种特定基因的探针，将从样品中提取并经PCR扩增和荧光标记的特异基因片段与基因芯片上的探针杂交，利用专门的光学仪器，能够检测到这些杂交信号（带有荧光标记的双链核酸），杂交信号出现在某物种的探针位点上，说明样品来自于该物种。 ;基因芯片上固定探针的方法;基因芯片制作和检测的原理;实验方案;第一部分 细菌培养;第二部分提取纯化大肠杆菌基因组DNA;第二部分 实验步骤;5、加入与菌液等体积（1.6ml）的苯酚/氯仿/异戊醇混合液，用漩涡混合器混匀，4000r/min离心10min。注意吸取混合液前将混合液充分振荡混匀。 6、取上层水相至无菌离心管，再加入等体积的氯仿/异戊醇混合液，用移液器反复吹打混匀，4000r/min离心10min。 7、将上层水相转移到另一个无菌离心管中，加入2μl RNase A，37℃水浴中温育30min。 8、加入等体积的氯仿和异戊醇混合液，充分振荡， 抽提残留在水相中的苯酚。4000r/min离心10min。 9、将上清液移至新的离心管中。;10、加入上清液1/10体积的3mol/L NaAc溶液，以及上清液2倍体积的无水乙醇，颠倒混匀以沉