柠檬酸摇瓶发酵及提的取by_LeMon.pptVIP

柠檬酸摇瓶发酵及提取 生技08-2班 L3eMon小组 廖维华 刘露 刘豫宁 麻佳佳 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 实验目的： 1、学习掌握柠檬酸液体发酵工艺 2、了解柠檬酸提取工艺 3、增强团队协作能力 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 柠檬酸：C6H8O7 物化性质：白色结晶粉末，无臭。 ? 熔点(℃), 153 ℃。味极酸，在潮湿的空气中微有潮解性。它可以以无水合物或者一水合物的形式存在：柠檬酸从热水中结晶时，生成无水合物；在冷水中结晶则生成一水合物。加热到78 ℃ 时一水合物会分解得到无水合物。加热至175 °C时它会分解产生二氧化碳和水，剩余一些白色晶体。所以，柠檬酸提取过程中，温度控制很重要。 分子式： 实验原理 高度亲水性 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 实验原理 柠檬酸发酵为典型的有机酸发酵，淀粉质原料经淀粉酶作用水解为葡萄糖，葡萄糖经EMP途径氧化为丙酮酸，丙酮酸进一步被氧化脱羟生成乙酰CoA，就一般能量代谢过程而言，生成的乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸后进入三羟酸循环，通过三羟酸循环进行有氧呼吸的能量代谢。 但就柠檬酸产生菌（黑曲霉菌）而言，在实验pH下，其顺乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶活性很低，而柠檬酸合成酶的活性很高，因而大量积累柠檬酸。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 柠檬酸的发酵的过程 80%的糖代谢走EMP途径 黑曲霉中存在TCA的酶系 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 柠檬酸发酵的条件 1、合适的碳源（淀粉、麦芽糖、甘露糖等），高浓度的糖； 2、合适的pH值，黑曲霉在pH为2～3的环境中发酵糖，产物以柠檬酸为主；当pH接近中性时则大量产生草酸， 而柠檬酸产量很低； 3、发酵液中溶氧量要高（摇床的转速200r/min）。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 生产菌种： 黑曲霉 Aspergillus niger 半知菌亚门，丝胞纲，丝孢目，丛梗孢科，曲霉属。真菌中的一个常见种。生长适温37℃，最低相对湿度为88% 柠檬酸产量最高的菌种。且能利用多样化的碳源。 生产方法： 深层液体发酵法 发酵周期短，产率高，节省劳动力，占地面积小，便于实现仪表控制和连续化 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 实验流程 斜面 发酵培养基 接种 补糖 4d ,28℃ 提取 （马铃薯葡萄糖琼脂培养基） （摇床） （每48h补一次） Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2C6H8O7·H2O + 3CaCO3 → Ca3(C6H5O7)2·4H2O + 3CO2↑ + H2O 中和终点pH:6.0～6.8温度：50～70℃ 菌液过滤 中和 酸解 过滤 脱色 去金属离子 浓缩结晶 Ca3(C6H5O7)2·4H2O + 3H2SO4 + 4H2