生物总复习选修3 专的题1.pptVIP

选修3 现代生物科技专题 ;考纲内容及能力要求 ;基础梳理 ;;2.基因工程的基本工具 (1)“分子手术刀”—— __________ ①来源：主要是从__________中分离纯化出来的。 ②功能：能够识别双链DNA分子的某种__________的核苷酸序列，并且使每一条链中__________部位的两个核苷酸之间的__________断开，因此具有__________性。 ③结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：__________和__________。;(2)“分子缝合针”——__________ ①两种DNA连接酶（E?coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： a.相同点：都缝合__________键。 b.区别：E?coliDNA连接酶来源于__________，只能将双链DNA片段互补的__________之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合__________，但连接平末端之间的磷酸二酯键效率较__________。 ②与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将__________加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接__________的末端，形成磷酸二酯键。;(3)“分子运输车”——__________ ①运载体具备的条件 a.能在受体细胞中复制并稳定保存。 b.具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 c.具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ②最常用的运载体是__________,它是一种裸露的、结构简单的、独立于__________核区DNA之外，并具有__________的双链__________DNA分子。 ③其他运载体：__________、__________。;归纳整合;二、DNA连接酶与DNA聚合酶 DNA连接酶与DNA聚合酶都能形成磷酸二酯键（在相邻核苷酸的3位碳原子上的羟基与5位碳原子上所连磷酸基团的羟基之间形成），但两者的性质各不相同。 （1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。 （2）DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。;（3）另外还介绍几种酶 ①解旋酶：该酶能在DNA复制或转录时破坏DNA碱基对间的氢键，从而将双螺旋打开。 ②DNA水解酶：该酶能催化DNA水解。 ③RNA聚合酶：该酶能在转录时将单个的核糖核苷酸连接成RNA单链。 ④限制酶：该酶的作用是识别特定的核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。; 三、基因工程的操作工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶简称限制酶，主要存在于原核生物中，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。目前已经发现了200多种限制酶。例如，从大肠杆菌中发现一种限制酶只能识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因，就能被该种限制酶切割下来。DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端（如下图所示）。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时，产生的则是平末端。;注 ：①用限制酶切割DNA分子时，被破坏的是DNA链中的磷酸二酯键（即连接相邻两个脱氧核苷酸的键）。 ②黏性末端是指双链DNA分子被限制酶切开后，切口处的两个末端伸出的由若干特定核苷酸组成的单链。;2.“分子缝合针”——DNA连接酶 从上图中可以看出，把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，然后让二者的黏性末端按碱基互补配对原则形成双链，用DNA连接酶催化两条DNA链的相邻两个碱基之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核苷酸连接起来。DNA连接酶有两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E?coli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4-DNA连接酶。E?coli DNA-连接酶只能连接将双链DNA片段互补的黏性末端，不能将连接双链DNA片段平末端。而T4-DNA连接酶既可以连接双链DNA片段互补的黏性末端，又可以连接双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率较低。;3.“分子运输车”——基因进入受体细胞的运载体 (1)使用运载体的目的 在基因工程中使用运载体有两个目的：一是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。 (2)运载体的种类 现在