小鼠试验性缺氧-河北北方学院病理生理试验教学中心.pptVIP

小鼠实验性缺氧 病理生理实验教学中心 张玉平 前 言 缺氧是临床上常见的病理过程，根据其原因不同可分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧及组织性缺氧四种类型。引起乏氧性缺氧的常见原因有大气中氧分压降低和呼吸系统疾病，其共同特征是动脉氧分压、氧含量、血氧饱和度均降低，实验中将小白鼠放入装有钠石灰的密闭缺氧瓶内，造成吸入气氧分压降低，从而引起乏氧性缺氧。血液性缺氧是由于血红蛋白性质和含量改变所致的缺氧，本实验利用一氧化碳和亚硝酸钠中毒的方法，使血红蛋白失去携氧能力，从而引起血液性缺氧，其中亚硝酸钠中毒所形成的高铁血红蛋白，可被还原剂美蓝还原成正常血红蛋白，恢复带氧能力，达到抢救和预防的目的。机体对缺氧耐受性受多种因素影响，本实验将探讨环境温度改变和中枢神经系统机能状态改变对缺氧耐受性的影响，当环境温度升高、中枢神经系统兴奋时，机体代谢率增高，单位时间内耗氧量增加，对缺氧耐受性降低；反之，机体对缺氧耐受性增强。 【实验对象】 40只小鼠 * * 1.掌握各型缺氧动物模型的复制方法。 2.观察缺氧时呼吸系统的改变及血液颜色的变化。 3.了解环境温度改变对缺氧的影响。 4.了解中枢神经系统机能状态改变时机体对低气压所致缺氧耐受性的影响 。 【实验目的】 小白鼠缺氧瓶，一氧化碳发生装置，广口瓶，5ml刻度吸管，1ml注射器，酒精灯，剪刀，镊子，蜡盘，小天平，负压吸引器（或抽气机）。 钠石灰，甲酸，浓硫酸，5%亚硝酸钠，1%美蓝，1%咖啡因，0.25%氯丙嗪，生理盐水，碎冰块。 【器械与药品】 为便于实验操作，取10只小鼠，从1~10进行编号，然后按以下步骤进行操作： 【步骤与方法】 （2）一氧化碳中毒性缺氧：取2号小白鼠放入广口瓶中，并与一氧化碳发生装置相连，然后将3ml甲酸与2ml 浓硫酸放于一氧化碳发生装置的锥形瓶中，塞紧后用酒精灯加热。 （3）亚硝酸钠中毒性缺氧：取3、4号小鼠，观察正常表现后，分别向腹腔注入5%亚硝酸钠0.3ml，其中3号注入亚硝酸钠后，立即腹腔注射1%美蓝溶液0.3ml，4号注入生理盐水0.3ml。比较两只小鼠的表现及存活时间。 （1）乏氧性缺氧：取1号小鼠及5克钠石灰放入缺氧瓶中，盖紧瓶塞，复制乏氧性缺氧。 1.各型缺氧的观察： （1）取两个氧瓶，各放入钠石灰5克。 （2）取500ml烧杯两个，一个加入碎冰块，将杯内水温调制0~-4℃，另一个加入热水，将温度调制40~42℃。 （3）取5、6号两只小白鼠，称重后装入两个缺氧瓶内，盖紧瓶塞，然后将两个缺氧瓶分别放于装有碎冰和热水的烧杯内。 （4）观察动物的一般状态和存活时间，并与室温条件下的1号小鼠进行对比。 2.环境温度改变对缺氧耐受性的影响： （1）取7、8、9号三只小鼠，于抽气前10分钟分别腹腔注射1%咖啡因、0.25%氯丙嗪、生理盐水0.3ml。 （2）将三只小白鼠放入负压吸引器的低压槽内，密闭容器。 （3）打开负压吸引器电源，抽气减压，从压力表上观察，减压速度为每分钟上升2000m，模拟高度，直至9000m，自减压开始记录时间，直至小鼠死亡，观察各组动物的一般表现，记算存活时间。 3. 中枢神经系统状态对低气压所致乏氧性缺氧耐受性的影响： 将10只小白鼠（未死者处死）按顺序放于蜡盘中，用剪刀剪开腹部并向上翻起腹壁，暴露肝脏，观察肝脏颜色变化。 4.肝脏颜色的观察： 1.缺氧瓶内外表面要干净透明，以利观察动物在瓶内的表现。 2.必须保证缺氧瓶完全密闭，否则会影响实验结果。 3.给小白鼠腹腔注药时要稍靠右下腹，勿损伤肝脏，也不要将药注入肠腔或膀胱。 4.测量耗氧量前，高、低温环境中的两只缺氧瓶必须在室温下平衡15分钟左右。 【注意事项】 *