酶联免疫吸附法测定盐酸克伦特罗常见误差分析及解决对策.pdfVIP

28 Journal of Animal Science and Veterinary Medicine Vo1 ． 27 No．1 2008 酶联免疫吸附法测定盐酸克伦特罗 常见误差分析及解决对策 范 锋，毛爱民，倪谷间 (无锡市畜牧兽医站，江苏 无锡 214026) 中图分类号：$852．5 3 文献标识码：A 文章编号：1004—6704(2008)01—0028—02 我中心从2003年起使用德国拜发公司提供的 (3)RIDA C18柱纯化流速未严格控制。组织 快速检测试剂盒检测近 30000份样品，对检测过程 分离出的上清液在通过 C18柱纯化时，速度过快， 中常见误差进行了归类与统计，现表述如下： 会使盐酸克伦特罗抗原没有完全吸附；甲醇洗脱时 速度过快，会使盐酸克伦特罗抗原没有完全洗脱，最 1 德国拜发试剂盒的检测标准要求 后在测定时都可导致测量结果偏低。 l_1 检测对象 (4)对于一些浓度超出最高检出限8．1 g／L的样 可以检测尿、肌肉及牛眼等组织样品。 品，稀释的倍数过大，虽然能在检测范围内可以检测出 1．2 检测环境要求 其浓度，但是增加了误差，测出的结果准确底偏低。 1．2。1 室温2O～24℃，使用之后立即将所有试剂 2．1．2 操作程序 由于操作过程的主观能动性的 放回2～8℃。 原因，可造成各种误差。 1。2．2 在所有恒温孵育过程中，要避免光线照射。 (1)an样(试剂)不完全。操作不稳定，一些样品 1．3 结果标准控制 (试剂)会留在微孔的边缘上，比如在加抗体溶液或 1．3．1 平行样检测变异系数(CV)3O 。 酶标记物不完全使最终测得结果(盐酸克伦特罗含 1．3．2 标准品偏离度(Deviation)1 。 量)偏高；加入标准或处理好的样品、或基质／发色试 1．3．3 样品回收率6O ～120 。 剂不完全使最终结果偏低。在加样时，有的枪头会 1．3．4 最低检出限为1．0 btg／L。 留有一滴液体，造成每个微孔中加入液体体积的不 l-4 仪器、试剂要求 一 致，最终会出现标准曲线的线性不好，或平行性不 单波长450 nm的紫外微孔板酶标仪。0标准 好的现象。 的盐酸克伦特罗标准液吸光度值(A s )O．6。 (2)洗板不规范可影响结果。蒸馏水连续清洗 2 常见误差产生原因分析 微孔，如果最后一次没有完全除去孔中的蒸馏水，会 使最终结果偏低；加样时将液体溅入另一孔中，人工 2。1 实验室操作技术 洗板时将