展青霉素分子印迹聚合物的制备及应用研究.docVIP

　　展青霉素分子印迹聚合物的制备及应用研究 --1 前言 1.1展青霉素概述 1.1.1展青霉素的理化性质 展青霉素主要由青霉、丝衣菌属、曲霉属和裸囊菌属等真菌在生长过程中产生的有毒次级代谢物，其结晶体为无色菱形，溶点110.5-112 °C,真空状态下的挥发温度介于70-100 °C，紫外最大吸收波长275-276 rnn之间，该物质易溶于水、氯仿、丙酮、乙醇和乙酸乙醋等有机溶剂，微溶于乙醚、苯/不溶于石油酸。展青霉素在酸性环境中有较强的稳定性，而在碱性环境中活性降低，易被破坏[2]，在有硫酸或氢氧化’钠存在的环境中易水解，具有不饱和内酷的特性,易与含巯基（-SH)化合物反应。展青霉素还可与20%硝酸作用生成草酸，与碱性碘液作用生成碘仿。 1.1.2展青霉素的及其污染情况 展青霉素是一种具有致畸性和致癌性的有毒真菌代谢产物，很多青霉都能产生展青霉素，据报道，共有超过30个属60多种霉菌可以产生展青霉素[4],其中包括扩张青霉、展青霉、棒状曲霄、石状青霉、产黄青霉、新西兰青霄、粒状青霉、圆弧青霉、巨大曲霉、萎地青霉、土曲霉等，其中棒曲霉和展青霉的产毒能力最强。许多食品如腐烂变质的苹果、山楂、李子、桃、香蕉、疲萝、蜜瓜、櫻桃、辣椒、葡萄、神子、黄瓜、胡萝卜等及其制品中均有发现展青霉素的存在[5]。展青霉素在霉变的水果中普遍存在已是不争的事实，但其在外观看起来新鲜的水果中也有可能存在。据报道，来自多个国家的研究发现在苹果汁中也会存在展青霉素，包括澳大利亚、比利时、巴西、加拿大、法国、日本、南非、西班牙、瑞典、英国、美国和土耳其[气而我国，特别是一些中小型企业生产的产品，也同样存在此问题。 展青霉素在苹果汁中存在的时间最长，因其在低pH条件下具有较强的热稳定性，巴氏杀毒很难将其去除，即使是80℃高温加热10-20 min也只能除去50%，加热20 min后仍会有45%的残留。而在潮湿的玉米、高粱、小麦中容易分解，在高蛋白低糖食品中，即使有产生毒素的菌属存在也是不适合展青霉素的存在。在面粉和肉类食品中展青霉素会与其中存在的琉基相互作用而被破坏，在橘子汁中也因其含有高含量的疏基化合物而致使展青霉素迅速被破坏[7]。因此展青霉素引入浓缩苹果汁中的几率最大。展青霉素已然成为判断苹果及其制品的一个重要的安全指标。据报道，展青霉素可以和二氧化硫反应，利用这一原理可以选用一些含有S02的抗氧化剂或是抗菌素之类的物质将果汁中的展青霉素破坏掉。此外，像抗坏血酸、硫胺、维生素B6等物质对减少展青霉素也很有效果，报道中指出蛋白质的存在也会破坏展青霉素降低含量[9]。 1.2固相萃取法 1.2.1固相萃取技术的基本原理 快速准确的检测食品中痕量残留的污染物是分析化学中极具挑战性的重要工作。痕量残留物因其含量极低对分析仪器的要求很高，利用现在的一些分析仪器直接测量低浓度的痕量物质很困难，不仅要求测量方法的灵敏度，还要排除基质的干扰，因此，在检测前样品的前处理起到非常重要的作,。传统的前处理方法都存在这局限性，不能满足痕量污染物的检测。固相微萃取技术（Solid-Phase Extraction，SPE) [34，35]是二十世纪末刚发展起来的一种对样品进行微量分离、纯化和富集的前处理技术。该技术是以色谱分离的原理为基础，釆用固体吸附材料将痕量的被测目标分子从液体样品中浓缔、分离、纯化，然后再以洗脱液洗脱或加热的方式对被测目标物进行解吸附，从而达到从复杂基质中分离、纯化、富集目标化合物的目的[36]。固相萃取设备构造简单，可以实现分离、纯化和浓缩一体化，是目前样品前处理最简便、高效、灵活技术，在食品、药品、环境和天然产物等领域收到了广泛的关注。其原理流程如图1-2所示[37]。 固相萃取的过程包括：（1)固相萃取填充材料的活化，活化过程的主要目的是去除填料上可能存在的杂质，同时可以使疏水性填料溶剂化，从而使填料能够吸附目标化合物，并获得更高的萃取率和更大的穿透体积。（2)样品吸附，利用真空或加压的方式使待测溶液经过萃取柱，使待测分析物尽量吸附在固体填料上。（3)洗漆，选择极性较弱的洗涤溶剂以去除吸附在填料上的干扰化合物。（4)目标分子的洗脱，选用合适的溶剂将吸附在填料上的目标分析物洗脱下来，收集洗脱液用于下一步的检测分析。 1.2.2固相萃取技术的优势 固相萃取技术与传统的萃取方法相比具有以下优势(1)不需要用超纯溶剂，有机试剂用量减少，对实验者及大气的危害降低，同时降低了实验成本；（2)可进行批量处理，既可以富集又能达到除杂的目的，使得分析物与干扰物有效的分开；(3)操作过程简便、快速、省力且易于实现自动化；（4)乳化现象减少，被测分析物回收率提高，重现性好，具有较高的富集因子；（5)应用广泛，可实现与其他检测技术的联用。 1.2.3固相萃取技术的分类