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抗虫基因cr3Bb对早粳稻空育131的转化
中文捅要
中文摘要
黑龙江省是我国最大的粳稻生产区,近些年受水稻负泥虫危害呈上升趋势,
使水稻的产量持续下滑,严重影响黑龙江省稻作经济效益。水稻空育131具有较
强的抗倒伏性、米质优良、出米率高、耐寒能力强等优点,近年来一直是黑龙江
省水稻栽培面积最大的品种。对空育13】进行遗传转化,培育高抗负泥虫水稻品
种具有重大意义。本研究对根瘤农杆菌介导的粳稻空育131遗传转化体系进行优
化;利用优化的转基因体系,选用bar为筛选标记基因,将在绿色组织特异表达启
究结果及结论如下:
1. 酶切鉴定与PCR验证目的基因cry3Bb+及其质粒,证明用于遗传转化的表
达载体及丑f基因正确,可被用于根瘤农杆菌介导的空育131遗传转化工
作。
2. 优化的水稻空育131遗传转化体系为:外植体糙米表面消毒方法是75%
酒精处理60s、O.1%升汞处理12min;水稻成熟胚愈伤组织诱导及继代的
培养基为NB培养基(N6大量元素、B5微量元素和B5有机物,pH5.8),
NAA,以及120mg/L维生素
添加2mg/L2,4-D、0.3mg/L6-BA和O.1rng/L
C;侵染愈伤组织的根瘤农杆菌菌液最佳浓度为OD=0.6。
3.利用优化的根瘤农杆菌介导的粳稻遗传转化体系,对早粳稻空育131进行
抗性愈伤组织232块。其中有38块独立抗性愈伤组织分化成苗。每个抗
性愈伤组织再生成苗1.3棵,共分化成苗76棵,移栽土壤后成活38棵。
呈抗性,抗性率为21.1%。
中文摘要
了mRNA。
关键词:粳稻;cry3Bb+;负泥虫;PCR:RT-PCR
.II—
Abstract
Abstract
isthe areaof sativa in
Heilongiiangprovince
largestproductionOryza subsp.Keng
in
China;however,theCrioceridaeharmhasledtothe decline
rising continuingyield
ofrice
inrecent affectsthericeeconomiesof
years,which
seriously Heilongjiang
Province,Having as
manyadvantages
stronglodgingresistance,goodgrainquality,
rice rateand cold
high yield strongtolerant rice 131 hasbecomethe
ability,theKongyu
cultivatedrice that the
variety areain
possesseslargestplanting Heilongjiangprovince
a1
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