第三章 植物主要组织培养方法(笔记).pptVIP

器官型繁殖的技术关键是满足培养对培养基要求高的条件，控制好激素浓度，避免愈伤组织发生。 此外，百合、贝母等外植体产生的小鳞芽等微型休眠器官需经低温处理打破休眠后栽种更适宜。 3. 器官发生型 指诱导器官外植体产生愈伤组织，经分化培养形成芽、根或胚状体再生成植株的方式。 如水稻、小麦、甘蔗常以幼嫩花序为外植体。 关键是外植体诱导产生的愈伤组织要早期挑选，使其来源尽量一致，且不宜反复继代。 特点： 繁殖速度较快；培养经愈伤组织阶段再生成植株，遗传性不稳定，易产生变异；愈伤组织是遗传转化、细胞培养或原生质体培养的良好材料。 4. 胚状体发生型 指植物器官、组织和细胞外植体经培养脱分化形成胚状体再成苗的方式，如甘蔗、胡萝卜、石刁柏等。 关键：提高不同外植体胚状体发生及萌发频率和提高胚状体同步化率。 特点：胚状体发生数量多、速度快、繁殖系数高 ；遗传性稳定。 5. 原球茎型 原球茎：是兰花种子萌发时产生的呈珠粒状、缩短的、类似嫩茎的器官，可萌发成苗。 原球茎型：指兰属特有的器官发生方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株。 兰花茎尖等外植体在组织培养中也可诱导产生原球茎，并且原球茎还可以切割成若干小块，分别形成新的若干原球茎从。 因此，一个兰花茎尖经一年反复诱导可以产生400万株兰花苗。 三、植物离体无性繁殖方法和影响因素 （一）植物离体无性繁殖的方法 1. 母株制备 2. 增殖 3. 植株再生及鉴定 4. 炼苗和移栽 1. 母株制备 母株：是指用于发生离体培养无性系的植物材料，母株制备即无菌培养物建立阶段。 制备母株是整个离体无性繁殖过程中至关重要的一步。 制备母株的技术关键 材料灭菌，选择健康、干净、无病虫害的材料，根据不同的外植体材料特点，如幼嫩程度、有毛或无毛、生长在地上或地下等，以及不同灭菌剂的效果，采用适当的灭菌方式，以达到无菌的目的。 培养基筛选。 2. 增殖 即繁殖体的增殖阶段，使无菌母株在无菌条件下通过各种离体繁殖途径扩增，这一时期是快繁过程中最主要的阶段。 外植体增殖速度的快慢关键也是培养基。 3. 植株再生及鉴定 植株再生是指将继代增殖的小芽（苗），转移至生根培养基中，诱导根分化，最终形成具根、茎、叶的完整小植株的过程。 有些植物（如石刁柏、黄瓜等）虽然不定芽在继代培养时可以生根，但有效根分化频率很低。 因此，离体无性繁殖常把根分化独立成一个步骤。 诱导小芽（苗）根分化的技术关键也是培养基，多数植物根分化需高水平生长素（极少使用2，4－D），低水平细胞分裂素或仅有生长素即可。 有些植物生根甚至无需任何植物激素。 一些难生根的植物用生长素加黑暗处理效果好。 培养基中无机盐成分下降有利于生根，如改用1/2MS或1/4MS培养基。 渗透压降低有利于生根，如糖含量约减少一半。 诱导小芽（苗）生根除在培养基上进行外，也可在试管外人工基质上进行，如糠灰、蛭石、珍珠岩、沙等基质可灭菌后使用，也可将无根小苗直接扦插于基质或将小苗嫁接在根系良好的砧木上。 再生植株的鉴定 是指利用细胞学和形态学等方法检查再生植株是否有遗传变异。植物离体无性繁殖因取材种类及品种遗传基础不同、外植体部位不同、器官发生途径不同、培养基成分不同以及植物激素诱变等因素，容易使某些可塑性强的外植体再生植株发生变异。 故培养的后代植株会因变异而与亲代遗传性不一致，影响试管苗质量，需鉴定。 4. 炼苗和移栽 组织培养产生的试管苗，长期处于无菌和异养条件下，生长势较弱，对外界环境适应能力极差。因此，需对其进行驯化（炼苗）。 移栽前一周揭开瓶盖，从无菌过渡到自然状态，接受日光照射，从异养过渡到自养。 移栽时，应将小苗基本培养基冲洗干净，避免有害微生物侵染。 移栽后，小苗首先应在相对湿度为70％～90％的环境下生长。 （二）植物离体无性繁殖的影响因素 1. 培养基 2. 培养条件 3. 外植体 第三章 植物主要组织培养方法 第一节 植物离体无性繁殖 第二节 无病毒植物培养 第三节 植物花药和花粉培养 第四节 植物胚胎培养 第一节 植物离体无性繁殖 一、植物离体无性繁殖的概念和意义 二、植物离体无性繁殖中的器官发生方式 三、植物离体无性繁殖方法的影响因素 无性繁殖 无性繁殖又称“克隆(clone)”。字源是希腊字,表示用离体的细枝或小树枝增殖的意思。这一名词于1903年引入园艺学,以后逐渐应用至植物学、动物学和医学方面。一个无性繁殖系是指从一个祖先通过无性繁殖方式产生的后代,是具有相同遗传性状的群体。无性繁殖方式有营养繁殖、单性生殖等。 不经生殖细胞结合，由母体的一部分组织直接产生后代。 无性繁殖系可以是从一株苹果树嫁接产生的所有苹果树,从一条匍匐茎产生的所有草莓植株,从一块植物