2012年海淀期中试题简答部分.pptVIP

;简答题中所反映出来的问题 ;简答题;;42．(10分) I．逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图15所示。图上的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因。(E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点)。 (1)逆转录的模板是＿＿＿＿，原料是＿＿＿＿＿。 (2)在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是＿＿＿＿＿，此过程需使用的酶是＿＿＿。为了筛选出含重组质 粒的大肠杆菌，一般需要用添加＿＿＿＿＿的培养基进行培养。获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组逆转录病毒。; Ⅱ．图16为培育转基因小鼠基本过程的示意图。请回答下列问题： (3)如A为重组质粒溶液，将其导人原核期受精卵的方法是＿＿＿＿＿；如A为重组逆转录病毒，还可采取＿＿＿＿ 方法。 (4)小鼠出生后可从其尾巴提取＿＿＿＿分子，通过＿＿＿＿＿ 方法，可检测出携带目的基因的小鼠。 (5)若目的基因进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是＿＿＿＿＿。;43．(7分)制备转基因克隆动物多是以易于核移植的胚胎成纤维细胞(EF)作为核供体。转入人生长激素基因的鼠胚胎成纤维细胞(tEF)不能分泌人生长激素，推测其不具备相应的细胞质条件而影响了基因表达，从而影响了对转基因细胞的筛选。为快速筛选出这类细胞，研究者设计了如图17所示的大致流程，据此回答问题：;(1)杂合细胞可以分泌人生长激素，说明该细胞具备分泌生长激素的＿＿＿＿＿＿条件。 (2)这一分泌现象说明指导人生长激素合成的基因来自于 ＿＿＿ 细胞，分泌生长激素的条件由＿＿＿＿细胞提供。 (3)培养和诱导融合等操作均需在严格的＿＿＿＿环境条件下操作，且配制的合成培养基通常需要加入＿＿＿＿＿等一些天然成分。 (4)生长激素的化学本质是＿＿＿＿＿，所以可以采用＿＿＿＿＿方法检测杂种细胞的分泌量。;;;46．(9分)紫杉醇是一种高效、低毒、广谱的天然抗癌药物。利用红豆杉细胞培养生产紫杉醇是最有可能解决紫杉醇药源紧缺问题的途径。科学家经过多年研究，终于成功利用生物技术人工合成出大量的紫杉醇。 (1)通过＿＿＿＿法和放在＿＿＿＿（较高渗/低渗）条件下能制备出红豆杉细胞的原生质体。 (2)将紫杉醇合成的关键酶基因导入红豆杉原生质体中，再生出细胞壁，将转基因成功的细胞作为＿＿＿＿，接种到MS培养基上。在MS培养基上，往往还要添加 ，其作用是＿ ＿＿＿ 。 经过一段时间的培养，会形成愈伤组织，此组织的细胞特点是＿＿ ＿＿，并能产生紫杉醇。;Q A;