生物化工工艺学--第9章--生物质质分离与纯化.ppt

第五节 膜分离过程(membrane separation) 一 概述 四 膜及其特性 五 膜组件 六 膜的污染与清洗 七 应用 第六节 电泳 一 概述 5 电泳的固体支持介质分类 （1）按支持介质的不同可分为：1 纸电泳（Paper electrophorisis）2 醋酸纤维薄膜电泳（Cellulose Acetate electrophoresis）3 琼脂凝胶电泳（Agar Gel electrophoresis） 4 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）。 （2）按支持介质形状不同可分为： ⑴ 薄层电泳 ；?? ⑵ 板电泳 ；?? ⑶ 柱电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 1 应用 主要用于测定单链蛋白质或者蛋白质分子的亚基相对分子质量，是目前测定亚基相对分子质量的最好的方法。 主要特点是测定蛋白质相对分子质量的过程中，排除了蛋白质因电荷密度不同而产生的差异。 亚基一般只是一条多肽链，这此多肽链相互间以二硫键相连，有时亚基也称为单体。 1.3 种类 连续系统目前常用的多为圆盘电泳和板状电泳，两者电泳原理完全相同。 膜分离法包含着非常丰富的内容，在生物分离领域应用的膜分离法包括微滤(Microfiltration,MF)、超滤(Ultrafiltration，UF)、反渗透(Reverse osmosis，RO)、透析(Dialysis，DS)、电渗析(Electrodialysis，ED)和渗透气化(Pervaporation，PV)等，各种膜分离法的原理和应用范围列于上表。 一个容器中间用一张可透过溶剂(水)，但不能透过溶质的膜隔开，两侧分别加入纯水和含溶质的水溶液。若膜两侧压力相等，在浓差的作用下作为溶剂的水分子从溶质浓度低(水浓度高)的一侧(A侧，纯水)向浓度高的一侧(B侧，水溶液)透过，这种现象称为渗透。 促使水分子透过的推动力称为渗透压。 1 反渗透 与RO膜一样，超滤(UF)和微滤(MF)都是利用膜的筛分性质，以压差为传质推动力。但与RO膜相比，UF膜和MF膜具有明显的孔道结构，主要用于截留高分子溶质或固体微粒。UF膜的孔径较MF膜小，主要用于处理不含固形成分的料液，其中相对分子质量较小的溶质和水分透过膜，而相对分子质量较大的溶质被截留。 2 超滤和微滤 如图5.3所示，利用具有一定孔径大小、高分子溶质不能透过的亲水膜将含有高分子溶质和其他小分子溶质的溶液(左侧)与纯水或缓冲液(右侧)分隔，由于膜两侧的溶质浓度不同，在浓差的作用下，左侧高分子溶液中的小分子溶质(例如无机盐)透向右侧，右侧中的水透向左侧，这就是透析。 透析原理 3 透析 电渗析是利用分子的荷电性质和分子大小的差别进行分离的膜分离法，可用于小分子电解质(例如氨基酸、有机酸)的分离和溶液的脱盐。电渗析操作所用的膜材料为离子交换膜，即在膜表面和孔内共价键合有离子交换基团，如磺酸基(SO-3）等酸性阳离子交换基和季铵基(N＋R3 )等碱性阴离子交换基。键合阴离子交换基的膜称作阴离子交换膜，键合阳离子交换基的膜称作阳离子交换膜。在电场的作用下，前者选择性透过阴离子，后者选择性透过阳离子。 4 电渗析 膜的定义: 在一定流体相中，有一薄层凝聚相物质，把流体相分隔成为两部分，这一薄层物质称为膜。膜本身是均匀的一相或是由两相以上凝聚物质所构成的复合体。被膜分隔开的流体相物质是液体或气体。膜的厚度在0.5mm以下，否则就不称为膜。 生物分离过程常用的膜分离技术为超滤、微滤和反渗透。 为实现高效率的膜分离操作，对膜材料有如下要求： (1)起过滤作用的有效膜厚度小，超滤和微滤膜的开孔率高，过滤阻力小； (2)膜材料为惰性，不吸附溶质(蛋白质、细胞等)，从而使膜不易污染，膜孔不易堵塞； (3)适用的pH和温度范围广，耐高温火茵，耐酸碱清洗剂，稳定性高，使用寿命长； (4)容易通过清洗恢复透过性能； (5)满足实现分离目的的各种要求，如对菌体细胞的截留、对生物大分子的通透性或截留作用等。 1 天然高分子材料 主要是纤维素的衍生物，有醋酸纤维、硝酸纤维和再生纤维素等。 2 合成高分子材料 市售膜的大部分为合成高分子膜，种类很多，主要有聚砜、聚丙烯晴、聚酰亚胺、聚酰胺、聚烯类和含氟聚合物等。 其中聚砜是最常用的膜材料之一，主要用于制造超滤膜。 3 无机材料 主要有陶瓷、微孔玻璃、不锈钢和碳素等。 由膜、固定膜的支撑体、间隔物(spacer)以及收纳这些部件的容器构成的一个单元(unit)称为膜组件(membrane module)或膜装置。膜组件的结构根据膜的形式而异，目前市售商品膜组件主要有管式、平板式、螺旋卷式和中空纤维(毛细管)式等四种。