《仪器分析》第六章++色谱分析导论.pptVIP

因为色谱柱的塔板数n值通常在数百至数十万之间，而r的值比n更大得多，因此可以得到： 因为每一次跳动通过色谱柱的流动相体积等于一个塔板上占据的流动相的体积Hqk，所以保留体积等于跳动次数与Hqk的乘积， 和平衡色谱理论的结果一致。 塔板理论的色谱流出曲线方程 上面的式子不够直观，因此需要进行适当的数学变换。当二项式分布的n，r很大时，可以用正态分布函数来表示： 当足够量的流动相（r足够大时）经过色谱柱后，溶质开始从柱后流出并进入检测器产生响应讯号。进入检测器的溶质量等于第r次跳动（流动相体积为V）分布在最后一块塔板上的流动相中溶质。可知进入检测器的溶质浓度为： 流出曲线方程或者是塔板理论方程。 塔板高度和理论塔板数的计算方法 根据色谱峰呈Gaussian分布曲线可以导出计算理论塔板数的另一个公式。因Gaussian曲线不同高度上的相对宽度，即色谱区域宽度能够用标准偏差?来衡量，色谱峰的峰底宽W=4 ?，因此： 每米柱长上的理论塔板数，定义为色谱柱效，以n’=n/L表示。它是评价色谱柱效能的指标。 采用塔板数评价柱效时，须注意标明： 组分 固定相及其含量 流动相及其操作条件 柱温 塔板理论小结 导出了色谱流出曲线方程，初步阐明了溶质分布随流动相体积变化的规律，给出了保留值的关系式、计算色谱柱效的方法以及色谱峰区域宽度的关系式。 不能解释不同流动相流速下同一溶质将给出不同的理论塔板数。 没有阐明理论塔板数和塔板高度的色谱含义和实质。 没有深入讨论影响塔板高度的因素，对色谱体系的设计、操作条件的选择的指导意义十分有限。 3）速率理论 1956年Van Deemter等人提出速率理论，Giddings等进一步加以完善。它将塔板理论中的塔板高度概念与组分在两相间的扩散传质联系起来，采用随机模式描述组分在柱内的分离过程。 随机过程总是导致Gaussian分布，采用标准偏差?或者?2作为溶质分子在色谱柱内离散的度量。总的离散程度应该是单位柱长分子离散程度的累计，且与柱长成正比： 比例因子H为单位柱长的分子离散： 为了简便，H仍然称为理论塔板板高度，简称板高。 色谱柱中并不存在所谓的塔板，在速率理论中，理论塔板高度是色谱柱内一个小单元中溶质分子离散的程度。作为一个色谱参数使用，是色谱峰扩张的指标。 塔板高度的统计意义 色谱过程中存在多种无规则的分子运动状态，引起色谱区带扩张。根据随机理论，有限个独立随机变量和的方差等于它们的方差和。色谱过程总的色谱区带扩张等于各个独立因素引起色谱区带扩张的和，即各独立离散项具有加和性： 涡流扩散 采用细而均匀的填料，均匀填充可降低涡流扩散。 纵向分子扩散 Dm与分子量有关，N2、H2；液相Dm小。 流动相传质阻力 a b c 固定相传质阻力 流动相 流动相 固定相 固定相 多孔填料时可以用dp代替df。 Van Deemter速率理论方程 填料粒度与填充情况 扩散系数 流动相线速 固定相用量 组分分配比 哪些方法可以提高柱效？ H~u曲线 判断色谱柱填充情况 比较色谱柱性能 根据Van Deemter方程可以求出Hmin和uopt： * * 色谱分析导论 色谱法及其分类 色谱流出曲线和术语 色谱分析基本原理 1 色谱法及其分类 （1）定义： 色谱法是一种物理化学分离和分析方法。它是基于物质溶解度、蒸汽压、吸附能力、立体化学或者离子交换等物理化学性质的微小差异，使其在流动相和固定相之间的分配系数不同。当两相做相对运动时，被分离物质在两相之间进行反复多次分配，这样原来微小的分配差异产生了很大的效果，使各组分分离，从而达到分离、分析以及测定一些物理化学常数的目的。 （2）历史： 色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）于1906年提出的。 现代色谱方法的分离与检测是在线连续进行，记录时间－组分浓度信号图即色谱图。 固定相 流动相 （3）分类： （a）按照流动相和固定相物态分： 气相色谱：气-固，气-液 液相色谱：液-固，液-液 超临界流体色谱 （b）按照分离原理分： 吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱 凝胶色谱、生物亲和色谱 （c）按照分离系统的结构形状分： 柱色谱、毛细管色谱、平板