植物生物技术概论和植物组织培养原理方法及胚胎培养201309.ppt

3.克服种子休眠，提早结实 植物休眠从几天到几年不等。某些园艺植物如落叶树的育种和繁育工作因种子休眠期太长而受到影响。休眠的种子在给于合适的温度、氧气和湿度条件也不能萌发，而应用胚培养常常可以克服这一类种子发育上的障碍，促进胚的生长发育。通过胚的离体培养，可使休眠期缩短 。 苹果属的一些品种，种子播种后在土壤中需几个月才能萌发，离体培养的胚却能在48h萌发，4周内形成移植幼苗，5个月的幼苗长达1 m高。 4.获得单倍体植株 单倍体的产生方法很多，通过远缘杂交，结合胚培养技术是获得单倍体的有效方法之一。栽培大麦与球茎大麦进行杂交，受精作用几乎完全正常，但由于二者的细胞分裂周期不同，合子胚在经过几次有丝分裂以后，球茎大麦的染色体被淘汰，子细胞中只留下大麦的染色体，为大麦单倍体。 5.缩短育种周期，提高育种效率 在育种实践中，为了加快育种进程，可采用离体胚培养的方法。例如蔷薇属植物的栽培品种常需1年才能开花。从离体培养胚获得的幼苗只需2~3个月即可开花，而利用这种花作父本，1年内可产生2个世代，大大地提高育种进程。 6.稀有植物的繁殖(使种子无生活力或胚发育不全的植物获得后代) 许多落叶果树的种子是早熟的,种子往往不育。用胚胎培养可以将不能正常萌发的种子培养出第二代植物。 兰花、天麻的种子成熟时，胚只有6~7个细胞，多数胚不能成活。如在种子接近成熟时，把胚分离出来进行培养，就能生长发育成正常植株。 椰子（Cocos nucifera）的胚乳是液体的，为液体胚乳。有一种变异类型，它们的椰子不能形成液体胚乳，取而代之的是一种柔软肥厚的组织。这些果实被称做“Makapuno”。因这种变异类型的种子不能繁殖，故“Makapuno”十分稀罕，价格非常昂贵，在菲律宾只有盛大宴会才供应这种果实。应用离体胚培养技术，将“Makapuno”的种胚进行离体胚培养已成功地由“Makapuno”种子获得了植株，且85%后代所结的果实均是“Makapuno”。 二、胚培养技术 成熟胚培养：子叶期后至发育完全的胚 胚培养 幼胚培养：子叶期以前的具胚结构的幼小胚 操作过程：取材和消毒 胚的剥离 接种 （看护）培养 图2-1 荠菜胚正常发育的各个时期(引自Raghavan，1966) (A)合子，(B)双细胞原胚，(C~E)球形胚，(F)心形胚，(G)中间期，(H)鱼雷形胚，(1)拐杖形胚，(J)倒U形胚，(K)成熟胚 图2-2 车轴草、百脉根和山马蟥属植物杂种胚的胚乳看护培养法(引自Williams等，1980) (A~B)由出现胚乳发育障碍的胚珠中取出杂种胚； (C)一个发育正常的种内授粉胚珠，其中含有的细胞期胚乳包围着一个鱼雷形到心形期的胚，在这个时期将胚珠剖开，取出胚乳用做看护组织， (D)将正常胚挤出胚乳囊，留下一个孔状出口： (E)把杂种胚通过孔状出口嵌入到正常胚乳中 三、胚培养的影响因素 1、胚龄 一般说来，胚龄大小与成活率成正相关 。 离体胚培养时，胚的发育有以下几种可能性途径： （1）胚胎发育途径：幼胚经过心形期，再发育到鱼雷形期，进而进入子叶期，最后萌发成苗。这是幼胚培养成功的途径。 （2）早熟萌发途径：幼胚从心形期发育到鱼雷形期后，不经过子叶期直接发育成苗，即跳过某一个发育阶段，这样的幼苗往往很弱小，组织不健全，且难于培养成正常的植株。 （3）产生愈伤组织：幼胚培养过程中细胞脱分化产生愈伤组织。通过幼胚培养产生的愈伤组织，经植株再生同样可得到远缘杂种。据报道，由胚培养产生的愈伤组织较其它外植体容易得到再生植株。 （4）停止生长或幼胚死亡。非常小的幼胚进行培养时，接种后常遇到细胞生长停滞，如不采取一些拯救措施，幼胚细胞即死亡。 2、培养基 成熟胚培养只要求含有无机营养元素、几种维生素和少量激素的基本培养基。而未成熟胚一般不能在这类简单培养基上生长，它们比成熟胚对营养的要求更为复杂，除了无机和有机营养、维生素、氨基酸、激素外，胚乳的看护对于幼胚培养十分重要。 3、培养条件 温度：大多数植物的离体胚培养温度为25℃~30℃。不同的植物类型对其温度要求也不相同。起源于低纬度地区的喜温植物要求较高的温度，而起源于高纬度地区的耐低温植物所需的温度相对较低。 光照：光对于某些植物胚胎的生长并不很重要，但对某些植物胚却有很大影响。主要表现在光能抑制未成熟胚的早熟萌