或基因精确量测技术的研发在生医检测的重要性越来越显着.DOCVIP

磁性奈米粒子於生物醫學上之應用 文/楊謝樂 物理及生醫科技的整合研發，已蔚為目前生物物理或生物醫學發展的主要方向之一。甚之，結合奈米技術後，更開啟許多前瞻且具產業開發價值的研究題材。本文中將介紹近年來一個新興的研究主題：磁性奈米粒子在生物醫學上的應用。文中將舉本研究群這幾年來，在磁性奈米粒子之特性、其與生物分子間的作用機制、以及在生物醫學上之多種應用的研發成果為例，說明磁性奈米粒子在生物物理或生物醫學研究的應用可行性。期能讓讀者瞭解此一新興主題之發展及將來生醫學術研究及產業的衝擊性。 生物醫學上所需之磁性奈米粒子必須要是分散在水溶液中。然而，磁性奈米粒子一般常是Fe3O4、MnFe2O4、CoFe2O4等單晶所構成，其不溶於水，因此需要在磁性奈米粒子表面披覆上一層親水性的界面活性劑，以使磁性奈米粒子能穩定地分散在水中即所謂的磁性流體。磁性流體中磁性奈米粒子受水分子熱擾動的作用，在無外加磁場下，該流體無自發性磁偶極。但當有磁場施加在該流體時，液體中的磁性粒子之磁矩會傾向沿著外加磁場方向，因而產生了磁偶極。而當外加場移除時，由於磁性奈米粒子受水分子熱擾動的作用，再度呈現出零磁偶極。這現象即所謂之超順磁性(superparamagnetism)。 磁性奈米粒子另一個重要特性，就是其大小與生物分子相近，故藉由適當地改造粒子表面的生化特性，可使粒子與特定生物分子相結合，致使生物分子帶有磁性標記。目前，生醫技術上經常使用此一特性進行免疫檢測、細胞分離、基因轉殖及其他多項應用。以下將介紹幾種本研究群正積極開發的生物分子磁性標記技術應用。 磁性標記免疫檢測乃是利用分散在水中之披覆有生物探針(probe)的磁性奈米粒子來與待測生物分子(target)結合成磁性叢集（magnetic cluster）後，再藉由量測這些磁叢集的磁性大小以檢測待測抗體含量的新穎檢測方式[1-6]。生物探針的選擇是使用與測生物分子具高專一性及強力結合性的抗體或抗原。以檢測avidin為例，我們可選擇其抗原biotin為生物探針，透過化學反應將biotin披覆在Fe3O4奈米磁性粒子之界面活性劑上，如圖1所示[3,4]。這些磁性粒子有一部份會藉由biotin與avidin相結合而形成磁性粒子叢集。藉由量測這些磁性粒子叢集的種種磁特性，可定量地量測出待測樣品中avidin的含量。目前所量測的磁性粒子叢集之磁性包括磁鬆弛(magnetic relaxation)、殘磁量(magnetic remanence)及混頻交流磁導率(frequency mixing ac magnetic susceptibility)。以下簡介此三種量測原理 A. 磁鬆弛免疫量測 此檢測法所應用的原理是磁性奈米粒子在液體中的超順磁特性(super-paramagentism)。以檢測avidin為例，我們可選擇biotin為生物探針，使avidin與磁性奈米粒子結合。與avidin結合的磁性粒子會進而形成磁叢集（magnetic cluster），如圖1所示。在外加磁場為零時，這些磁性粒子的磁偶極方向是均向性的，因此總磁偶極矩為零。但當一非零外加磁場施加時，這些磁性粒子的磁偶極會轉到沿外加磁場方向，而產生非零的總磁偶極矩M。而當此一外加磁場除去時，沒有與avidin結合的單獨磁性粒子會因熱運動而將其磁偶極方向打亂，不再朝向原外加磁場方向，因而造成總磁偶極矩減小，此一現象稱為布朗式磁鬆弛(Brownian relaxation)[7]。根據研究指出，未與avidin結合之單獨磁性粒子磁鬆弛時間常數大約在數微秒((s)[8-10]。而與avidin結合的磁性粒子所形成的磁叢集之磁鬆弛機制則是另一種稱為Neel relaxation的原因[11]，其磁鬆弛時間常數約為數十個毫秒(ms)。因此只要在除去磁場約數毫秒後，單獨磁性粒子即可完成磁鬆弛，只剩下與avidin結合之磁叢集在進行磁鬆弛。此時再開始量測磁叢集之磁鬆弛，即可避免量測到未與avidin結合之磁性粒子磁鬆弛訊號，如圖2(a) 所示。以含相同量之磁性粒子的磁性流體與不同avidin含量之樣品相混合[12]，會量測到不同的磁鬆弛行為。所加的avidin愈多時，總磁偶極矩M變化愈大。理論上，此總磁偶極矩隨時間的變化是M(t) = Mo,Neel ln(1+(tcma/t)。將圖2(a)中的實驗結果與此式比較，我們可以得到每一avidin含量的Mo,Neel，並進一步獲得Mo,Neel與avidin含量的校正關係，如圖2(b)所示。將來我們可由所量到的Mo,Neel透過圖2(b)得到待測avidin的精確含量。由上可知，此種磁性生醫量測不需經過繁雜的清洗/分離過程，大大地簡化檢測程序。此外，最新的研究報導指出，這種檢測的靈敏度較傳統螢光檢測方