2015-2016高中生物专题5课题3血红蛋白的提取和分离练习新人教版选修1教材.doc

2015-2016高中生物 专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离练习 新人教版选修1 一、凝胶色谱法——血红蛋白的分离方法 1．概念凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法也称作分配色谱法。原理(1)凝胶(2)分离原理：相对分子质量较小的蛋白质：容易进入凝胶内部的通道路程较长移动速度较慢通过凝胶柱的时间较长。相对分子质量较大的蛋白质：无法进入凝胶内部的通道只能在凝胶外部移动路程较短移动速度较快通过凝胶柱的时间较短。作用在一定范围内缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响维持pH基本不变。配制通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成调节缓冲剂的使用比例就不同pH范围内使用的缓冲液。——血红蛋白的分离或鉴定方法 1．概念带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。原理(1)许多重要的生物大分子如多肽、核酸等都具有可解离的基团在一定的pH下正电或负电。(2)在电场的作用下这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。(3)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同使带电分子产生迁移速度从而实现样品中各种分子的分离。　蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。 一、选择题使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为下图中(B)解析：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道路程较长移动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质路程较短移动速度较快首先洗脱出来。使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于(B)电荷的多少 B．分子的大小肽链的多少 D．分子形状的差异解析：SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别使电泳迁移率完全取决于分子的大小。在血红蛋白的整个提取过程中不断用磷酸缓冲液处理的目的是(D)防止血红蛋白被氧气氧化血红蛋白是一种碱性物质需磷酸中和磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程让血红蛋白处在稳定的pH范围内维持其结构和性质解析：pH，从而维持血红蛋白的结构和性质。蛋白质的分离与纯化是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是(A)根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性可将样品中各种不同的蛋白质分离根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等可通过电泳分离蛋白质根据蛋白质相对分子质量的大小可通过凝胶色谱法分离蛋白质根据蛋白质的分子大小、密度不同可通过离心沉降法分离蛋白质在提取血红蛋白的样品处理阶(B) A．让红细胞破裂释放血红蛋白洗去血浆蛋白防止血液凝固保证红细胞的正常形态解析：血液中含有多种蛋白质除红细胞内的血红蛋白血浆中还含有多种蛋白质这些蛋白质在血红蛋白释放出后会与其混合需要在红细胞破裂前将其除去。蛋白质提取和分离分为哪几步(C)样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳样品处理、凝胶色谱操作、纯化样品处理D．样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定解析：蛋白质的提取和分离分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定四步。A中凝胶色谱操作及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。下列对凝胶电泳的相关认识错误的是(A)蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只取决于分子的大小蛋白质在SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小－聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋D．凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响解析：SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质分子所带的负电荷远远超过天然蛋白质分子的负电荷消除了不同蛋白质分子的电荷效应使蛋白质分子相对迁移率的大小完全取决于相对分子质量的高低。在血红蛋白的提取和分离实验中下列操作正确的是(A)分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆红细胞释放出血红C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D．洗脱时待红色蛋白质下移即开始收集流出液解析：分离红细胞时要及时除去血浆蛋白。释放红细胞时需要加入蒸馏水和甲苯。分离血细胞时要短时低速离心即一般为500 r/min离心2 min否则白细胞会一同沉淀达不到分离效果。分离血红蛋白时要高速长时间离心以2 000 r/min的速度离心10 min。洗脱时待红色的蛋白质接近色谱柱底端用试管收集流出液。以下关于猪血红蛋白提纯的描述不正确的是(D)洗涤血红细胞时使用生理盐水可以防止红细胞破裂猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核提纯时杂蛋白较少血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测在凝胶色谱法分离过程中血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢解析：在凝胶色谱法分离蛋白质的过程中相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道路程较长移动速度较慢；而相对分子质量较大的分子无法进入凝胶内部的通道只能10．下列有关提取和分离血红蛋白的叙述错误