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人工膝关节假体设计中股骨下端的形态学测量.pdf
承 德 医 学 院 学 报
VO1.31No.32(:14
低,损耗大。 测波长:214rim。结果显示样品出蜂时间与标准品比较,时间
基本一致,初步确定产品为GSH,所得产品的HPLC纯度为
37.55%。
2.9 O01×7阳离子交换树脂对GsH的分离纯化重复扩大实
验结果 在25℃、400~/min的条件下利用超滤膜除去大分
子蛋白,上柱最适宜pH=3,洗脱液为0.2M Na0H,洗脱流
速为2.0ml/min,进行重复扩大实验。果见表2,GSH的平均
洗瞄穗l濂遵/(吐 回收率为73.94o/0。
图5不同流速对CaSH洗脱的影响
表2001X7阳离子交换树脂对GsH的分离纯化重复扩大实验结果
2.6 洗脱液的选择 分别选用0.IM 冰醋酸、0.35M 冰醋
酸,0.IM NaOH、0.2M NaOH,0.3M醋酸钠+0.IM NaOH
作为洗脱剂,检测洗脱液中GSH的含量,并计算GSH的回
收率。结果见表1:用冰醋酸洗脱时体积较大,冻干繁琐,时
3小结
间长。因此,选择洗脱体积小且回收率高的0.2M NaOH洗
采用001×7阳离子交换树脂和超滤膜结合的方法分离
脱,且GSH能集中洗脱下来,所含杂质较少。
纯化GSH,结果显示此方法可行,可为GSH的进一步扩大生
表1不同试剂洗脱对GsH回收率的影响
产提供实验数据。根据实验结果确定在25V、4000r/min的
条件下利用超滤膜除去大分子蛋白,上柱最适宜pH值为3,
洗脱液为0.2M Na0H,洗脱流速为2.0ml/min,产品GSH
的纯度为37.55%。
参【考文献】
[1] 王大慧,卫功元.谷胱甘肽的应用前景及生产研究现状
[J].化学与生物工程,2004,(3):10__12.
2.7 洗脱终点的判断 采用亚硝基铁氰化钠法检测,取一
[2] 周宇光,付国平,肖仔君.谷胱甘肽的生产和应用研究进
滴洗脱液,滴入1.5%亚硝基铁氰化钠溶液(饱和硫酸铵溶
展[J].食品工业科技,2003,(3):89-91.
液配制),观察颜色变化,如果颜色变为红色,表明还未洗脱
[3] 邱雁临,胡静,缪谨枫,等.利用大孔树脂从啤酒废酵母
完全,反之,则洗脱液中无GSH存在,停止洗脱。 中分
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