非酒精性脂肪肝细胞模型中INK4位点反义非编码RNA和p14 ARF及p16 INK4a的表达.pdfVIP

． 3146． 查堕堂 !竺0月箜 鲞箜20期 GuangdongMedicalJournalOct．2014，Vo1．35，No．20 非酒精性脂肪肝细胞模型中INK4位点反义非编码 RNA和 p14 F及 p16 的表达 谢玲珠 广东省汕头市中心医院信息科 (515031) 【摘要】 目的 研究INK4位点反义非编码RNA(ANRIL)、p14AR和p16 的表达与非酒精性脂肪肝细胞增 殖的关系。方法 油酸 以不同浓度 (25、50、100~mol／L)和时间(12、24、48h)作用HepG2细胞，采用油红0染色 观察细胞内脂滴形成，同时运用ELISA检测细胞内三酰甘油含量，构建非酒精性脂肪肝细胞模型；采用MTT法检 测细胞增殖情况。接着实时定量RT—PCR和Westernblot检测长非编码RNAANRIL以及其反义转录本p14AR和 pl6 的mRNA水平，Westernblot检测p14 和pl6 蛋白表达水平。结果 在 50Ixmol／L油酸作用于HepG2 细胞 24h时，细胞增殖活力最为旺盛，且脂质含量增加明显。在这个细胞模型中ANRIL、p14AR和pl6 的表达 均低于正常对照组。结论 不饱和游离脂肪酸作用下，ANRIL和 p14AR、p16‰表达呈同向性改变；在非酒精性 脂肪肝细胞模型中