B 细胞非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织CD22抗原表达检测及临床意义.docVIP

　　B 细胞非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织CD22抗原表达检测及临床意义 ：张东生 丁娅 李苏 黄慧强 夏忠军 李志铭 林旭滨 姜文 【摘要】 【目的】 检测CD22抗原在非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织中的表达，初步探讨CD22抗原在非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织的表达和临床病理特征的关系。【方法】 采用免疫组化方法检测B细胞非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织CD22抗原的表达，分析肿瘤组织CD22抗原表达和临床病理特征等的关系。【结果】 CD22抗原在B细胞非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织阳性表达主要见于细胞浆和细胞膜。全组21例，阳性率100.00%(21/21)，强阳性(+++)率14.29%(3/21)，中等阳性(++)率33.33%(7/21)，弱阳性率(+)52.38%(11/21)。CD22表达与病理亚型、性别、年龄以及其它临床病理特征等无明显相关性。【结论】 CD22抗原在B细胞非霍奇金淋巴瘤中广泛表达，可以采用免疫组化的方法检测出，该方法简单易行，有一定临床应用前景;B细胞非霍奇金淋巴瘤组织CD22表达和临床病理特征的关系需进一步研究。 【关键词】 非霍奇金淋巴瘤; CD22抗原; 免疫组化 　Abstract： 【Objective】 To examine the CD22 antigen expression in B cell non-Hodgkins lymphoma (NHL) tissues and investigate its relationship munohistochemistry staining. The correlation betmunohistochemistry staining. The positive staining particles a and/or membrane. CD22 expression oderate expression in 7 cases (33.33%)， and munohistochemistry staining， and the detection method can be used in clinical practice. CD22 expression in B cell NHL tissue and its relationship 厚的切片粘在涂胶玻片上备用。 　　1.2 患者资料 　　患者为自2007年4月至2008年11月来中山大学肿瘤 医院 就诊，共21例B细胞非霍奇金淋巴瘤患者。21例患者中，男10例，女11例，年龄范围24 ～ 67岁，中位年龄52岁，体力情况0 ～ 2级。21例患者的病理亚型，滤泡性淋巴瘤8例，滤泡转弥漫2例，弥漫大B细胞淋巴瘤8例，小淋巴细胞淋巴瘤/慢性淋巴细胞白细胞(SLL/CLL)2例，伯基特淋巴瘤1例;19例为复治患者，2例为初治患者，均为滤泡性淋巴瘤;复治患者既往使用过CD20单抗治疗，或一种或多种方案化疗，部分患者接受过放射治疗。8例患者既往使用过美罗华或国产CD20单抗，1例移植后复发，1例既往使用过Zevalin。 　　1.3 实验主要试剂和步骤 　　抗CD22抗体购自武汉博士德生物工程有限公司(进口分装)，为1只0.2 mL 兔抗人IgG多抗。S-P超广谱免疫组化试剂盒(含阻断血清、二抗与三抗)及DAB购自迈新公司。免疫组化步骤按照迈新公司推荐的S-P法免疫组化实验步骤进行。切片放入二甲苯梯度稀释液中脱蜡，无水乙醇梯度至水，新鲜配置3%过氧化氢，室温10 min灭活内源性过氧化物酶，PBS微波修复抗原，滴加血清封闭以减少非特异性染色，滴加1：100稀释的CD22兔抗人多抗，4 ℃反应过夜，滴加生物素化二抗IgG 37 ℃反应30 min，DAB显色，苏木素轻度复染30 s左右，盐酸分化，二甲苯透明，用中性树胶封片。 　　1.4 免疫组化结果判断 　　对照HE切片，确定肿瘤细胞区域。以肿瘤细胞胞浆或胞膜见到棕黄色或棕褐色颗粒染色为阳性细胞，连续数10个高倍镜视野中的肿瘤细胞数，10个视野中阳性肿瘤细胞数之和除以10个视野中肿瘤细胞数之和即为肿瘤细胞染色的百分比，根据肿瘤细胞染色的百分比划分为不同的等级：(-)或阴性为阳性细胞0;(+)或弱阳性为阳性细胞比例≤25%;(++)或中等阳性为阳性细胞比例达 gt; 25% ～ lt; 50%;(+++)或强阳性为阳性细胞比例≥50%。(-)和(+)为低表达，(++)和(+++)为高表达。 　　1.6 统计学方法 　　采用SPSS 16.0统计软件进行统计分析，频数资料采用Fisher精确概率法以及非参数的Kruskal-Wallis H检验，以P lt; 0.05定义为有统计学意义。 　　 2 结 果 　　2.1 CD22抗原在非霍奇金淋巴瘤肿瘤组织中的表达