大孔吸附树脂精制川芎工艺研究.doc

　　大孔吸附树脂精制川芎工艺研究 中药经过第一步的提取后，往往还存在大量的无效成分及杂质，这些都会在一定程度上影响中药的服用剂量，储存时间等，为了对目标成分进行精制，人们研制出了许多的方法，而大孔吸附树脂以其操作简便，价格低廉，生产安全性高等优点成为制药过程中的首选精制手段。本文就较系统的对大孔吸附树脂对川芎的精制进行了研究，为其它中药的精制提供了借鉴。 1 试药及试剂 1.1 试药 川芎 购自哈尔滨同泰药店 经鉴定为伞形科植物川芎（Ligusticum chuanxiong Hort.）的根茎。 1.2 试剂 D101型,HPD110型大孔吸附树脂 天津南开大学化工厂 AB-8型 河北沧州树脂厂 NK9,LSA-20型（葵花药业惠赠） 2 试验方法结果 2.1 大孔吸附树脂的预处理 根据大孔吸附树脂对苷类的吸附特性，取一定量的大孔吸附树脂D101型、HPD110型、AB-8型、NK9型和LSA-20型，用适量95％乙醇（大约高出树脂10㎝）浸泡24小时使其充分溶胀，在室温下超声振荡四小时，洗去残留的杂质，用95％乙醇冲洗，洗至流出液与蒸馏水1：2混合不产生混浊，改用蒸馏水洗，洗至无醇味，备用。 2.2 树脂含水量的测定 称取各种树脂20g（平行样3个），烘箱中110℃烘干至衡重，测定含水量，取平均值，结果见表1。 表1 树脂含水量的测定 树脂 LSA-20 HPD110 D101 NK9 AB-8 含水率％ 72.75 51 74.35 66.35 69.10 2.3 树脂的选择 通过考察每种树脂对川芎提取液的醇沉回收水液的吸附能力及其解析等能力的比较，确定最佳的树脂。 2.3.1 静态吸附试验 精密量取已知处理好的D101型、NK9型、AB-8型、HPD500型和LSA-20五种树脂10ml，置50ml锥形瓶中，加样品液5ml，超声1小时，然后静置24小时，使其达到饱和吸附，测定丁香苦苷含量，计算树脂对样品液中有效成分的吸附能力S。其计算公式S吸＝（C1C2）V/g/ml ） C2为吸附后样品浓度（mg/ml）；V1为所用提取液的体积（ml） l干树脂重 饱和吸附量 （mg/ml ） （mg/ml） （g） （ mg/g干树脂） D101型 10.370 0.932 1.9257 43.82 AB-8型 10.370 1.647 2.1768 40.07 NK9型 10.370 0.408 3.3280 29.93 LSA-20型 10.370 2.655 2.2253 34.67 HPD110型 10.370 1.682 2.1541 40.33 2.3.2静态吸附―洗脱性能试验 将饱和吸附后的树脂滤除多余溶液，并用4倍树脂体积的蒸馏水洗树脂，然后加入50％乙醇30ml，超声振荡1小时后，放置24小时，测定洗脱液中丁香苦苷的含量，计算洗脱率，洗脱率计算公式为：S解＝C3V2/S吸g/g干树脂) (mg/g干树脂) ( %) D101型 43.82 29.55 67.43 AB-8型 40.07 24.92 62.19 NK9型 29.93 10.94 36.55 LSA-20型 34.67 24.82 71.59 HPD110型 40.33 21.73 53.88 图1 吸附速率曲线 将上述树脂中的溶液吸干，加入80 ml，50％乙醇解吸附，超声振荡1小时，在1，3，5，10，15，25分钟取样，测定丁香苦苷的含量，解吸附速率结果见图2。 图2 解吸速率曲线 由图1.、2可以看出D101型大孔吸附树脂在吸附、解吸的速率上均优于AB-8和HPD110型大孔吸附树脂，故选择D101型大孔吸附树脂为佳。 2.3.4 川芎嗪的泄漏曲线的测定 取经预处理的D101型大孔吸附树脂25ml，湿法装入301.2㎝的柱子中，加入川芎提取液的醇沉回收水液（1：2），调节流速为2BV/h，收集流出液，每个试管收集5 ml，测定川芎嗪含量，根据试验结果，绘制川芎嗪的泄漏曲线(图3),由图3可知从第四瓶便开始有川芎嗪被检测出来，因而上样量应在5：4～5：6（树脂:原药材）的范围内。 图3 泄漏曲线 2.3.5 洗脱剂浓度的选择 选用D101型树脂，经过预处理后装柱4根（柱直径为1.2cm，装25ml树脂），各上样5ml（2g生药／ml），分别用4BV蒸馏水，4BV30％，50％，70％的乙醇洗脱，流速为1ml/min，各洗脱液分别收集1BV 4份，测定川芎嗪含量，结果见表4及图4。 表4 洗脱剂浓度的选择 体积数（BV） 洗脱溶剂 浓 度（mg/ml） 1 2 1 2 3 4 蒸馏水洗脱液 30％乙醇洗脱液 50％乙醇洗脱液 70％乙醇洗脱液 蒸馏水洗脱液 0.0059 0.0032 0.0012 0.0011 0.015 0.014 0.010