核因子κB抑制剂对大鼠胰十二指肠移植后缺血再灌注损伤的保护作用.doc

　　核因子κB抑制剂对大鼠胰十二指肠移植后缺血再灌注损伤的保护作用 ：陈茂松，崔海宁，张克君，贾贵清 【摘要】 目的：探讨大鼠胰十二指肠移植后核因子(NF)κB活化对炎性介质表达和中性粒细胞浸润集聚的影响。方法：建立大鼠腔静脉内分泌引流、肠道外分泌引流的动物模型，脯氨酸二硫代氨基甲酸酯(ProDTC)组供体胰腺保存在ProDTC的UIP2)、胞间黏附分子1(ICAM1) mRNA表达，检测胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)的活性，酶联免疫吸附试验(ELISA )检测血清TNF α和MIP2的含量 。 结果：与对照组相比， ProDTC组NFκB p65蛋白和TNFα、MIP2、ICAM1 mRNA表达明显下降， MPO活性明显减低( P均lt; 0.01)。结论：ProDTC抑制NFκB活化，下调TNFα、MIP2、ICAM1的表达，从而减轻中性粒细胞浸润及胰十二指肠移植后的缺血再灌注损伤。 【关键词】 再灌注损伤;核因子(NF)κB;胞间黏附分子1;肿瘤坏死因子;巨噬细胞炎性蛋白质 [ABSTRACT] Objective: To discuss the effect of nuclear factorκB(NFκB) activating on cytokines expression and neutrophil accumulation in rat pancreaticoduodenal transplantation. Methods： To establish a rat model of pancreaticoduodenal transplantation g/kg of proline dithiocarbamate(ProDTC)in experiment group and ount of normal saline in control group 30 minutes before transplantation.The donor pancreases ent group and UPO, and NFκB p65 protein and TNFα,MIP2, ICAM1 mRNA analysis by using IP2 analysis in serus by using ELISA methods. Results：pared TNFα and MIP 2 as yeloperoxidase (MPO) in rats receiving ProDTC(all P lt; 0.01) .Conclusion： ProDTC protects against pancreasticoduodenal ischemiareperfusion injury by suppressing NFκ B activation and subsequent expression of proinflammatory mediators. 　　[KEY acrophage inflammatory proteins 　　胰腺移植过程中,缺血—再灌注( ischemicreperfusion, I/R)损伤会导致许多并发症, 直接威胁着供胰和受体本身的存活, 严重时可导致移植失败。多项研究表明，I/R损伤与核因子(NF)κB活化有明显的相关性。本实验应用特异性NFκB抑制剂脯氨酸二硫代氨基甲酸酯( ProDTC)抑制大鼠胰十二指肠移植I/R后NFκB 的活化，探讨 NFκB 在中性粒细胞介导的I/R损伤中所起的作用，现将结果报道如下。 　 　1 材料与方法 　　1. 1 实验动物及分组 　　雄性清洁级封闭群SD大鼠(供体)和清洁级封闭群IP2)检测试剂盒(分别由北京邦定生物工程公司和晶美生物工程公司提供)，兔抗大鼠NFκBp65多克隆抗体(Santa Cruz 公司)，兔抗鼠Actin 多克隆抗体(北京中山公司)，34进行图像定量分析。 　　1. 4. 2 胰腺组织中TNFα、MIP2 和胞间黏附分子1(ICAM1) mRNA 表达分析(逆转录聚合酶链反应，RTPCR) 采用TRIzol一步法提取总RNA,按逆转录试剂盒(TaKaRa公司)说明书合成cDNA。引物由大连宝生物工程有限公司合成,序列为:(1)TNFα(506 bp):上游：5′TGAATCTGTAGTGCCTCAGG3′;下游：5′CACGCTCTTCTGTCTACTGA3′;(3)MIP2(287 bp):上游：5′GGCACATCAGGTACGATCCAG3′;下游：5′ACCCTGCCAAGGGTTGACTTC3′;(3)