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并借助血细胞计数板,计算单位体积的细胞或微小生物的数.ppt
* 实验三 细胞形态多样性及细胞计数 一. 实验原理 应用显微镜的成像原理,并借助血细胞计数板,计算单位体积的细胞或微小生物的数量。 二.试剂与器械 器材 :光学显微镜、血细胞计数板。 三.实验步骤 取血细胞计数板,加盖玻片盖住两边的小槽。 充液:用小滴管将一小滴稀释血液滴在盖玻片边缘的玻片上,使稀释血液借毛细管现象自动渗透入计数室中。如滴入过多,溢出并流入两侧槽内,使盖玻片浮起,体积改变,会影响计数结果,需用滤纸把多余的溶液吸出,以槽内没有溶液为宜。如滴入溶液过少,经多次充液,易产生气泡,应洗净计数室,干燥后重做。 计数:充液后静止1-2分钟,待红细胞下沉后,方可进行计数。计数四角及中央共5个中方格内的20个小方格中所有红细胞数,计数时为了防止重复和遗漏,应按一定的顺序,先自左向右数到最后一格,下一行格子则自右向左,再下一行又自左向右,即呈S形计数。对于分布在刻线上的红细胞,依照“数上不数下,数左不数右“的原则进行计数。计数时,如发现各中方格的红细胞数目相差20个以上,表示血细胞分布不均匀,必须重新计数。 4. 求出细胞分布平均数= d0 + d1+……+d10 / 20 细胞密度 =细胞分布平均数×稀释倍数×4000/mm3 四. 注意事项 防止液体滴入过多,否则溢出并流入两侧槽内,会使盖玻片浮起,体积改变,会影响计数结果。 五. 实验结果 细胞密度应在107左右。 六. 思考题 1.计算每立方毫米兔血中红细胞的数量。 2.了解鸟类与哺乳类动物红细胞的形态差异。 *
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