二氧化硫水溶液提取黑加仑中花色苷与酚类物质研究.doc

二氧化硫水溶液提取黑加仑中花色苷和酚类物质的研究J. E. Cacace and G. Mazza摘 要：水果、蔬菜、红葡萄酒有益人体健康主要归因于其中存在的花色苷及酚类物质。本文通过单因素实验研究了不同SO2浓度（28、300、700、1100、1372ppm）、温度（6、20、40、60、74℃）、液固比（6、20、40、60、74ml/g）对黑加仑中酚类物质的提取的影响。通过响应面法优化了花色苷和总酚的产量，以及提取液抗自由基和抗氧化活性。实验结果表明，酚类物质的提取效果受SO2浓度、液固比和提取温度的影响，花色苷和总酚的最佳提取条件为SO2浓度1000?1200 ppm，液固比为19L/kg冻浆果，浸提温度升高，浸提的速率增加，因而总酚和花色苷萃取平衡的时间将减少。然而，由于花色苷在较高的温度下会降解，因此建议提取温度为30-35℃。抗氧化活性试验的结果也同时受这三个因素影响，并且液固比约高，抗氧化效果越差。关键词：花色苷；酚类；黑加仑（黑醋栗）；二氧化硫；黄酮醇；提取工艺；抗氧化性；功能性食品；保健品前言研究表明水果、蔬菜中黄酮类化合物和其它植物化学物质对预防癌症、冠心病、中风有作用[1，2]。同时，黄酮和一些酚类物质还表现出多种生物活性，如消炎、抗菌，抗氧化和舒张血管的作用[2，3]。目前已经出现具有抗氧化活性的水果、蔬菜、谷物的产品[4，5]，研究表明，其抗氧化活性与黄酮类化合物的结构有着密切的关系[6-8]，同时，从越桔属、悬钩子属、虎耳草科酷栗属的浆果中得到花色苷和酚类化合物也具有抗氧化活性[9，10]。对富含花色苷的植物的调查表明，浆果是酚类化合物的最重要来源之一[11]。黑加仑是9中研究的浆果中活性第二强的[12]。黑加仑中的花色苷主要是矢车菊-3 -葡萄糖甙，飞燕草-3 -葡萄糖苷，矢车菊-3 -芸香糖甙，和飞燕草-3 -芸香糖甙[11，13]。其中矢车菊-3 -葡萄糖甙的抗氧化活性已被认为是目前商业用抗氧化剂（BHA、VE）活性的两倍[7]。另外，浆果中的黄酮醇、有机酸等物质也具有明显的抗氧化作用，如甜樱桃和蓝莓中含有的羟基肉桂酸可抑制食物中脂肪的氧化[14]。高浓度的羟基肉桂酸衍生物，尤其是咖啡因和P -香豆酸[15，16]，还有黄酮醇，如杨梅素，槲皮素，山萘酚，也是在黑加仑中发现[16-18]。采用液体溶剂提取植物中的化学物质是产品生产的重要一步。其中有两个基本概念：过程平衡和提取速率，分别表示从植物组织中提取化合物的多少和溶出速率。植物组织中的化合物会溶解到浸提的溶液中直至达到平衡。平衡方程为： （1）其中m是平衡常数，是目标化合物的在提取液中的质量分数，是目标化合物占干原料的质量分数[19，20]。m是溶质、溶剂和温度的特征常数。目前有采用不同的溶剂和酸化方式从葡萄酒渣[21]和草莓[22]中提取花色苷的研究，向日葵中萃取花色苷的效果也受萃取溶剂影响显著[23，24]。有研究表明，随着提取液中SO2 的增加，葡萄（Vitis vinifera）中的花色苷提取率也增加[25]。Gao 和Mazza的研究表明[23]，从葵花籽壳中萃取花色苷受溶剂类型的影响，二氧化硫水溶液的提取效果优于乙酸和乙醇水溶液，并且尽量使用二氧化硫水溶液作为提取溶剂是减少萃取过程中有机溶剂损耗和降低成本的解决方法。萃取的效果还将取决于何快速地使目标化合物在提取液中达到平衡浓度。浓度梯度越大，扩散系数较大，物料的粒径越小，萃取的速率越快。因此葵花籽壳破碎越彻底[23]，葡萄酒渣[26]的粒径越小，将获得更高的花色苷和酚类化合物提取率。温度升高，粘度系数下降，扩散系数就越大[27]。虽然有用二氧化硫水溶液作为提取液解决提取过程中花色苷热降解的报道[28]，但是从黑加仑中萃取酚类化合物，特别是萃取花色苷的最优条件迄今尚未见报道。响应面法已经成功地用于葵花籽壳中提取花色苷产量的优化[23]，同时也被用来选择最好的提取溶剂，温度，提取时间，以最大限度地提高脱脂琉璃苣粉的抗氧化活性[29]。本次试验目的是为了优化黑加仑中酚类化合物的提取，试验条件可按比例扩大。1.原料和方法1.1原料的制备：单个速冻的黑加仑；2000年生产季节（M G Brothers Farm, Abbotsford, BC）采摘后在-36℃下冻藏，直到使用。浆果放在液氮预冷粉碎机（model ED-5, Arthur H. Thomas Co., Philadelphia, PA）中捣碎，机器转速为520r/min，使用6mm的筛网和2.0mm的刀刃间距。在-25 ℃下用筛子（model Octagon 200, Endecotts Limited, London, U.K.）根据美国筛分标准筛分