HMGB1对人肝癌细胞株HepG2体外增殖的影响.pdfVIP

椭 大 01 ． ．net JCeentSSoout^ ( dSc) 20l0,35(5) http：／／xbyx·xysm·net 451 ，C HMGB1对人肝癌细胞株 HepG2体外增殖的影响 贺新春 ，范学工 ，周蓉蓉 ，WANGHaichao (1．中南大学湘雅 医院传染科 ，长沙 410008；2．纽约大学北岸医学院急诊科 ，纽约 11030) [摘要] 目的：观察 HMGB1对人肝癌细胞株 HepG2增殖的影 响并初步探 讨其可能机制 。方法：采 用不 同剂量 (0，10，50，l00ng／mL)重组 HMGB1(rHMGB1)刺激 HepG2细胞 24h，用 MTF法检测 HepG2 细胞增殖 ，Western印迹和 RT—PCR法检测 cyclinD1，PCNA的表达。结果 ：不同剂量 (10，50，100ng／mL) rHMGB1组 HepG2细 胞 增 殖 能力 均 明显 高 于对 照组 (P0．05)。HMGB1抗 体 (20 g／mL)能 中和 HMGB1(10ng／mL)对 HepG2细胞 的促增殖作用 (P0．05)。Western印迹 和 RT—PCR显示 ，与 对照组 比 较 ，HMGB1能 明显促进 HepG2细胞 PCNA，cyclinDI蛋 白和 mRNA的表达 (P0．05)，HMGB1抗体 能明 显抑制 HMGB1上调 PCNA，cyclinD1蛋 白和 mRNA的表达 (P0．05)。结论 ：HMGB1可能通过上调 cyc— linDl和 PCNA表达 ，促进 HepG2细胞增殖。HMGB1抗体对肝细胞癌可能有治疗作用。 [关键词] HMGB1； HepG2； 细胞增殖核抗原 ； cyclinD1 DOI：l0．3969／j．issn．1672—7347．2010．05．O08 EffectofHM GB1onhuman hepatoma cellline—HepG2proliferation HE Xinchun ，FAN Xuegong ，ZHOU Rongrong ，WANG Haichao (1．DepartmentofInfectiousDiseases，XiangyaHospital，CentralSouthUniversity， Changsha410008，China；2．DepartmentofEmergencyMedicine，NoahShore UniversityHospital，New YorkUn SchoolofMedicine ，NewYork11030，USA) Abstract： Objective To investigate the effectofhigh mobility group box一1 protein (HMGB1)ontheproliferativeactivityofhumanhepatomacelllineHepG2anditspotentialregula— ringmechanism．Methods TheculturedHepG2cellsweretreatedwithrecombinantHMGB1 (0， 10，50，and100ng／mL，respectively)for24h．CellproliferationwasobservedbyM1Tranalysis． Western blotandreversetranscriptase—polymerasechain reaction wereusedtodetecttheexpression of proliferatingcellnuclearantigen(PCNA)andcyclinDIproteinandmRNA，respectively．Results Comparedwith thecontrol’group，HMGB1at10，50，and 1O0ng／mL obviously increased