RP—HPLC法测定紫杉醇在大鼠血浆中的含量.pdfVIP

第25卷 第1期 沈 阳 药 科 大 学 学 报 V。】．25 NO．1 2 0 0 8年 1月 Journal of Shenyang Pharmaceutical University Jan．2008 P．48 文章编号：1006—2858(2008)01—0048—04 RP—HPLC法测定紫杉醇在大鼠血浆中的含量 杨 涛 ，崔福德 ，金大德 (1．沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳，110016；2．首尔国立大学药学院，韩国首尔151—742) 摘要：目的建立紫杉醇在大鼠血浆中的定量分析方法，为药物动力学研究提供分析方法。方法 采用RPHPLC法。u Chr。sphe 100反相C18色谱柱(250 mm×4．6 mm，5 m)，乙腈一水(体积比 50：50)为流动相，流速为1．0mL·min_。，紫外检测波长为227 nm，血浆样品经乙酸乙酯萃取。以内 标法定量。结果线性范围为0．025～100．0 mg·L (r=1．0，”=5)，日内RSD小于5％，日间RSD 小于10％，定量限25 g·I ～。在以7．5 mg·kg 的剂量静脉注射紫杉醇到大鼠身上后，药物很快 分布到体内(t ／2 a=0．16 h)，并且快速的消除，消除半衰期仅有1．65 h，药物的平均保留时间tMR 为O．52 h。结论所用方法简便、准确、专属性好。能够满足药物动力学研究的需要。 关键词：紫杉醇；反相高效液相色谱法；血药浓度 中图分类号：R 917 文献标志码：A 紫杉醇(paclitaxe1)是由红豆杉属植物中提取 的生物样品体积(大约0．5～2．0 mI )来提高分析 的一种二萜类化合物，被认为是过去三十年里最 方法的灵敏度_4 J。 有效的抗癌药物。紫杉醇(化学结构式见图1)能 在本研究中，以对羟基苯甲酸正丁基酯为内 够与细胞微管蛋白结合。在癌细胞分裂时诱导和 标(化学结构见图1)，建立了大鼠血浆中紫杉醇 促进微管蛋白的聚合，抑制其解聚，使细胞有丝分 血药浓度的HPI C检测方法，利用适当的有机 裂受到阻断，起到微管装配和微管稳定作用，从而 相，经过2次简单的液一液萃取法，不需配置固相 阻止肿瘤细胞的生长。紫杉醇对卵巢癌、乳腺癌、 分离柱。就能够满足紫杉醇的检测需要。该方法 非小细胞肺癌、头颈部癌症和前列腺癌均有较好 的特点是生物样品体积小(0．1 mL)，灵敏度高 的抗癌作用【卜 。 (定量限在25 g·I )，可以满足紫杉醇在大鼠 紫杉醇能够发挥其抗癌功能的浓度很低 体内药物动力学特征的研究。 (50 nmol·I ～，相当于44．5肚g·I ) ，因此建 l 仪器与材料 立灵敏的体内分析方法是开发紫杉醇的新剂型以 及研究该药物在体内过程的前提。目前紫杉醇在 离心沉淀器(韩国首尔Hanil科学技术有限 生物体液中浓度的分析方法很多，其中包括免疫 公司)，组织匀浆机(IKA—Ultra—Turrax。T25 ba— 分析法、液相色谱一质谱联用法和HPI C法等。 sic，德国)，高效液相色谱仪：装备有双泵(Waters 虽然免疫分析方法具有足够的灵敏度，但缺乏足 515)、Waters 2487双波长紫外检测器和Waters 够的专属性；液相色谱一质谱联用法灵敏度高，但 717自动进样器(美国Waters有限责任公司)。 成本昂贵，无法作为常规的分析工具来使用； LiChrospher~100反相c18色谱柱(250 mm× HPLC法，由于其方法简单、灵敏、成本低，而得到 4．6 mm，5 m，德