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革兰阳性菌分类生物学特性和鉴定
革兰阳性菌分类生物学特性及鉴定;内 容;细菌分类工具书;革兰阳性球菌新分类;葡萄球菌科; 乳杆菌科;气球菌科 ;肠球菌科 ;;链球菌科 ;BXIV门 ;革兰阳性球菌生物学特性;G+球菌;葡萄球菌属
微球菌属
口腔球菌属;触酶阳性常见菌属鉴别;葡萄球菌 微球菌;葡萄球菌属;分类;主要鉴定试验; 触酶试验( Catalase ):
原理:2H2O2 ? O2 + 2H2O;Catalase POS;注意事项:
1、细菌、试剂新鲜
2、血琼脂上菌落不宜作此试验
3、阴、阳性对照;
凝固酶试验
(Coagulase)
;Coagulase NEG; DNA酶
原理:DNA酶水解DNA长链,形成数个单核苷酸组成的单核苷酸链。
长链DNA被酸沉淀、
单核苷酸溶于酸
而出现透明环。
;操作:
将待测菌点种于DNA琼脂平板上,
35℃培养24-48h,
在细菌生长物上加试剂(菌落浸没)
试剂:1mol/L 盐酸
注意事项:
培养基表面凝固水烤干避免细菌蔓延状生长
;;金黄色葡萄球菌;表皮葡萄球菌;腐生葡萄球菌;;孔氏葡萄;镜下特点:G+C、葡萄状排列
;凝固酶阳性葡萄球菌鉴别试验;凝固酶阴性葡萄球菌鉴别试验;鉴定流程;微球菌属;分类;微球菌属生物学特性;藤黄微球菌;血琼脂:Micrococcus luteus ;;革兰染色:Micrococcus luteus ; 粘液口腔球菌
;粘液口腔球菌生物学特性;;触酶阴性革兰阳性球菌;;Lancefield血清学分群:A、B、C、D、F、G等18个群
溶血:α、β、γ;生物学特性;链球菌属主要鉴定试验; 杆菌肽(Bacitracin)试验
操作:K-B法贴杆菌肽纸片(直径6mm,0.04U/片),常规培养18-24h
结果判读:抑菌圈10mm 敏感。; CAMP试验:
原理:细菌具有“CAMP”因子,能促进葡萄球菌β溶血素的活性,使两种细菌在划线处呈现箭头形透明溶血区。;操作:血平板上待测菌与金葡菌垂直划线,划线之间留出 0.5-1cm ,不能相接。
;Optochin敏感试验;注意事项
1、做敏感试验的平板不能在CO2环境下培养,因其可使抑菌圈缩小。
2、同一血琼脂平板可同时测定几株菌株,但不要超过4株菌。
3、纸片可保存于冰箱中,一般可保存9个月。但如果已知敏感的肺炎链球菌检测为耐药时,纸片应废弃。; PYR试验
原理
细菌产生吡咯烷酮酰肽酶(PEP)、水解L-吡咯烷酮β-萘酚酰胺(PYR)基质,释放β-萘酚酰胺与试剂N,N-二甲氨基肉桂醛反应,产生桃红色为阳性。;操作:
将被检菌株接种上述试验平板上,35℃过夜培养后,加入一滴PYR试剂于菌落上,1min后观察结果。
结果判断
菌落出现桃红色为阳性,即水解PYR阳性,若菌落呈黄褐色是阴性。
;PYR商品化产品;血清分群诊断:
A、B、C、D、F、G;A群链球菌
(化脓链球菌);主要鉴定要点
β溶血
杆菌肽敏感
PYR试验阳性;阴性;临床标本培养后 混杂在口腔正常菌群中的化脓链; B群链球菌
(无乳链球菌);; CAMP试验阳性;;;马链球菌
β溶血; D群链球菌
(非肠球菌,牛链球菌等)
;主要鉴定要点
胆汁七叶苷阳性
6.5%氯化钠阴性;;C、F、G群链球菌的鉴定:
常需要血清学方法;肺炎链球菌;生物学特性;站苍名尹磋牧枷护盼孔碉稼扦残才臆贫侮汁肉猖跨朴汞莲蛰胸谦咨账用凿革兰阳性菌分类生物学特性和鉴定革兰阳性菌分类生物学特性和鉴定;肺炎链球菌;脐窝状菌落;粘液状菌落;肺炎链球菌;Optochin敏感;抄规梭篮陀军躯经凉企诱膝砾阎责刮愈星粳袜汐智抱蒜阎费缠狄境芥别爵革兰阳性菌分类生物学特性和鉴定革兰阳性菌分类生物学特性和鉴定;胆汁溶菌试验阳性;;;草绿色链球菌;菌群 ;鉴定流程;;分类;生物学特性;生化反应
胆汁七叶苷试验(+)
6.5%NaCl生长试验(+)
PYR试验(+)
血清学分类属D群;; 粪肠球菌;肠球菌属分群;肠球菌属Ⅰ群菌种的关键性试验;肠球菌属Ⅱ群菌种的关键性试验a;甲基葡萄糖吡喃糖苷(Methyl廿D-Glucopyranoside MGP)产酸试验
1、配制含有10 g/L MGP和0.006%溴甲酚紫的牛心浸液,分装试
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