丹酚酸B干预慢性马兜铃酸肾病大鼠疗效研究.pdfVIP

116 陕西中医2008年第29卷第1期 丹酚酸B干预慢性马兜铃酸肾病大鼠疗效研究 胡晓颖 何立群 王云满 应汝炯 上海中医药大学附属曙光医院(200021) 摘 要 目的：建立慢性AAN大鼠模型及观察SalB的干预作用。方法：将雄性SD大鼠随机分 为正常组、模型组、治疗组，正常组灌服生理盐水，实验组按马兜铃酸5mg／kg·d灌服马兜铃酸单体， 建立慢性AAN动物模型，治疗组按SalB10mg／kg·d灌胃治疗。各组分别在第2、4、6、8周留取24h 尿液，在第4、8周取血，分离血清，检测肾功能指标，第8周留取肾组织，观察病理变化。结果：随着饲 养时间的延长，马兜铃酸模型组尿p2一MG、尿NAG水平明显升高，肾小管间质病理损害明显，而 SalB治疗组尿p2一MG、尿NAG水平及肾小管间质病理损害较模型组明显减轻。结论：初步建立了 慢性AAN动物模型及SalB对马兜铃酸肾小管间质损害有一定的保护作用，能有效的降低尿p2一 MG、尿NAG水平，明显改善肾小管间质病理损害，改善肾功能。 主题词 肾病／病理学 马兜铃酸／化学 马兜铃酸／药理学 大鼠 随着对“马兜铃酸肾病”(Aristolochic acid nephropathy， 重变化趋势。 AAN)研究的开展及临床病例报道的不断增多，本病已基本被 1．2．2标本留取方法：在第 2、4、6和8周末将各组大鼠置 人们所 认 识，由最初 的“中 草药 肾病”(Chinese Herb 于啮齿类动物代谢笼中过夜采集尿液样本。尿液样本在送检前 Nephropathy，cHN)到AAN，虽然认识在不断深入，但其发病 保存于～4℃。所有样本(包括血液样本)在2日内送检。在第4 机制尚不清楚，仍然缺乏有效治疗手段。我们以马兜铃酸单体 周末尿液样本采集完毕后，对全部大鼠进行断尾采血。血液样 致大鼠肾损害并以丹酚酸B作为干预药物进行研究，旨在马兜 本在送检前保存于一4℃，下同。在第8周末尿液样本采集完毕 铃酸肾病大鼠模型的建立及验证和筛选有效干预药物。 后，用前述方法麻醉余下大鼠。解剖，用腹主动脉采血的方式采 1 材料和方法 集血液样本。然后立刻取出部分肾脏组织，用福尔马林固定液 1．1材料：实验动物：32只雄性 2月龄SD大鼠，采购自西 固定后，保存于一2O℃备组织学研究用。再取出另外的肾脏组 普尔一必凯实验动物有限公司，在上海中医药大学附属曙光医 织，立刻用液氮冷冻，然后保存在一4℃以备PCR实验使用。 院动物房(清洁级)饲养。实验药物：马兜铃酸(AA)：Sigma— 1．2．3观察指标：实验室指标：尿82一微球蛋白02一micro Aldrich公司，含 29 oA AA I和61 AA II。丹酚酸B(SalB)：由 — globulin，p2一MG)；尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿N～乙酰 中国科学院上海药物研究所从崇明岛人工栽培的丹参中分离 一 p—d～葡萄糖苷酶(N～acetyl—p—d—glucosaminidase， 提取和鉴定。 NAG)；血清肌酐(serum creatinine，Scr)；血清尿素氮(blood 1．2方 法：1．2．1动物模型制作及分组给药方法：将实验 urea nitrogen，BUN)。 动物随机分成3组进行药物处理：模型组(n一8)：每日接受AA 1．2．4实验数据统计分析：数据以平均值土标准误差表示。 灌胃，剂量为5mg／kg·d，灌胃体积为2ml／d。AA在灌胃前以 模型组、治疗组和对照组三组之间的比较采用单因素方差分析 生理盐水配制成悬浊液备用，下同。治疗组(n一8)：每日接受 ANOVA检验。任意两组间的比较采用LSD检验。上述统计步 AA灌胃(5mg／kg·d)后随即接受SalB灌胃(10mg／kg·d)， 骤均由统计软件SPSS v．11．0完成。统计学显著性水平设定在 灌胃总体积胃4ml／d。SalB在灌胃前