萆薢化浊栓对大鼠前列腺组织中TNFα、IL1β及iNOS作用的实验研究.docVIP

　　萆薢化浊栓对大鼠前列腺组织中TNFα、IL1β及iNOS作用的实验研究 【关键词】 前列腺炎;肿瘤坏死因子α;白细胞介素1β;诱导型一氧化氮合成酶;大鼠 　　[ABSTRACT] Objective: To discuss the possible pathogenesis of abacterial prostatitis and the possible treatment mechanism of BiXieHuaZhuoShuan. Methods: Set up abacterial prostatitis rat model rats and double immune adjuvant. Treated control blank group by blank suppository, and positive control group odel control group, high dosage group of BiXieHuaZhuoShuan, control group of QianLieAnShuan had significant difference in level of TNFα, IL1β and iNOS (Plt;0.01). Conclusion: BiXieHuaZhuoShuan has dosedependence effect on chronic abacterial prostatitis. It possibly mation and regulating immune system. Immune factors may play an important role in pathopoiesis of chronic abacterial prostatitis. 　　[KEY PBS、水合氯醛。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 大鼠前列腺蛋白提纯液的制作 参考 周晓辉、韩蕾等[2]制备大鼠模型方法。步骤：取雄性ol/L PBS缓冲液稀释为15 mg/mL浓度。 　　1.2.2 福氏完全佐剂(FCA)的制备 将液体石蜡与羊毛脂按2∶1比例共热至70 ℃混匀，高温灭菌后按5 mg/mL加入佐剂用卡介苗，无菌乳化后使用。 　　1.2.3 动物分组及造模 90只大鼠随机分成空白对照组(n=15)、动物模型组(n=75)。动物模型组按以下方法造模：将实验大鼠采用乙醚麻醉，腹腔注射百白破疫苗0.5 mL，多点皮内注射大鼠前列腺蛋白提纯液和FCA乳剂(比例为1∶1的混悬液)1 mL。正常对照组分别行腹腔及皮内多点注射0.9%生理盐水注射液1 mL。以上各组均分别于0,20 d、分2次注射。待恢复3 d后将动物模型组再随机分为：模型对照组(n=15);萆薢化浊栓高剂量组(n=15);萆薢化浊栓中剂量组(n=15);萆薢化浊栓低剂量组(n=15);前列安栓组(n=15)。 　　1.2.4 萆薢化浊栓制作方法 (1)萆薢化浊栓组方以及药量选择。 萆薢化浊栓是根据《医学心悟》[3]中萆薢分清饮加减变化而来。每剂口服萆薢化浊栓组成：萆薢10 g、黄柏10 g、丹参10 g、茯苓10 g、赤芍10 g、白术10 g。参照《中药制剂学》[4]栓剂的载药量一般与口服剂量相当。大鼠和成人用药剂量依据体重折算系数约为7∶1，正常成年男性体重约为60 kg，大鼠平均体重按250 g 计算 。分别计算出每颗大鼠用萆薢化浊栓的高、中、低剂量组的载生药量分别为3.5,1.75,0.9 g，比例为4∶2∶1;每颗成人用前列安栓重2 g，同理可知大鼠用量0.06 g。(2)栓剂的制备以及药物含量。实验药物经鉴定后，根据其有效成分分别进行提取浓缩;将前列安栓融化后备用;甘油、明胶水浴加热致熔化后,将提纯的药物、前列安栓分别均匀分散于基质中;将已配好的药液,倒入预先已涂过润滑剂的栓剂模具中,分别制作成高、中、低剂量萆薢化浊栓、空白栓和大鼠用前列安栓。萆薢化浊栓高、中、低剂量分别含生药量：3.5 g/颗、1.75 g/颗、0.9 g/颗;大鼠用前列安栓：0.06 g/颗。 　　1.2.5 给药方法 于造模成功后第3天开始给药，刺激大鼠充分排便后以0.1%水合氯醛腹腔麻醉;给药剂量除空白组外其余每天1颗，给药后用软木夹夹闭大鼠肛门，待大鼠苏醒后取下，持续时间约60 min，连续给药28 d。给药期间，模型对照组、前列安栓组有1只大鼠死亡，草蔛化浊栓高剂量组有2只大鼠死亡，经检查，未见异常。 　　1.2.6 前列腺组织取材和指标检测 给药28 d后，取出前列腺组织，右侧叶固定后石蜡切片，检测iNOS的表达;左侧叶ELISA法检测TNFα、IL1β。iNOS表达的结果判定(采用双