MS—HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用.pdfVIP

． 1732． 奎堕 20 1 旦箜 鸯箩l2期 GuangdongMedicalJournalJun．2012，Vo1．33，No．12 [11]WHEATERMJ，JOHNSONPW，BLAYDESJP．TheroleofMNK [J]．JViral，2011，85(13)：6381—6389 proteinsandelF4Ephosphorylationinbreastcancercellproliferation [14]DARBESFAHANIS，FAGGADA，NOSKEA，eta1．Phospho— andsurvival[J]．CancerBiolTher，2010，10(7)：728—735． mTOR andphospho一4EBP1in endometrialadeno—carcinoma： [12]KONICEKBW，STEPHENSJR，MCNULTYAM，eta1．Thera． associationwithstagenadgradeinvivoandlinkwithresponseto peutieinhibitionofMAPkinaseinteractingkinaseblockseukaryot· rapamycintreatmentinvitro[J]．JCancerResClinOncol，2009， lC‘in‘it‘iatio‘nfactor4E phosphorylationnadsuppressesoutgrowthof 135(7)：933—941． experimentallungmetastases[J]．CnacerRes，2011，71(5)： [15]CHOICH，LEEJS，KIMSR，eta1．DirectinhibitionofelF4E 1849—1857． reducedcellgrowthinendometrialadenocarcinoma[J]．JCancer [13]CENCICR，DESFORGESM，HAII|JDR，eta1．BlockingelF4E— ResClinOncol，2011，137(3)：463—469． elF4G interactionasastrategyto impaircoronavirusreplication (收稿 日期：2011—11—17 编辑 ：朱绍煜) MS—HRM检测游离 甲基化 SEPT9在结直肠癌 早期诊断中的应用术 王侦 ，陈嘉昌 ，何琼 ，彭焕玉 ，朱振宇 ，陈华云 ，李明 中山大学中山医学院(广州510080)；中山大学达安基因诊断中心(广州 510665)； 中山大学附属第三医院 病理科(广州 510630)；南方医科大学生命科学院(广州 510515) 【摘要】 目的 建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解 曲线(MS—HRM)定量检测血浆游离甲基化 SEPT9的方法，并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性。方法 按照不同比例混合 甲基化和未 甲基化DNA建立标准品，复管反应作出标准熔解曲线，定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆 样本甲基化SEPT9，并与Methylight进行比较。梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA，分析其 甲基化程度与 DNA量是否独立。随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS—HRM分析，以排除修饰不完全对实验结果 的影响。结果 SEPT9MS—HRM法可检出混合 甲样本中1％的甲基化，其检测灵敏度达 l％。36例结直肠癌患 者血浆中检测到25例(69．44％)有不同程度sEPT9基因甲基化 ，20例正常人血浆样本有2例(10％)呈现 1％～ 5％甲基化。不同DNA量 甲基化程度恒定，初步确定检测范围可达皮克级DNA。2例独立重复检测样本检测结果 基本符合初次实验结果。结论 MS—HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行 ，快速，稳定，敏感性高，检测样 本范围广。有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台。 【关键词】 结直肠癌；SEPT9；甲基化；高分辨率熔解曲线；MS—HRM 结直肠癌是临床较为常见的恶性肿瘤，发病率呈 硫酸氢钠的处理后产生不同的熔解 曲线 。目前，利 逐年上升趋势…。推广简单、快速、灵敏的早期检测方 用MS—HRM检测SEprI9启动子甲基化进而进行结直 法是控制结直肠癌病死率的一个行之有效的方法。研