p53对MEF细胞中波段紫外线损伤中miR-465表达的影响.pdfVIP

广东医学 2013年 1月第34卷第2期 GuangdongMedicalJournalJan．2013，Vo1．34，No．2 · l77 · p53对 MEF细胞中波段紫外线损伤中 miR一465表达的影响术 耿继武 ，高素珍，周关娟 南方医科大学公共卫生与热带医学学院放射医学系 (广州510515) 【摘要】 目的 研究中波段紫外线(UVB)损伤时，p53对MEF细胞的miR一465表达的影响。方法 实验采 用野生型小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF … )和 p53缺失的小鼠胚胎成纤维细胞 (MEFp5 )，首先分别验证 了这 两株细胞的p53蛋白表达的差异；其次分别观察 了这两种细胞在50J／m 的UVB照射后孵育不同时间细胞存活 率的改变及miR一465差异表达的情况。结果 MEF 一的p53表达水平呈缺失状态；经50J／m UVB照射后 ， 两种细胞的存活率均在照后2h出现显著降低，至照后24h未见明显恢复，且MEF邮 一的存活率在照后 多个时 间点低于MEF 细胞；MEF “中miR一465的表达下调而MEF I／一中miR一465的表达则上调，在照后2、 4、6和 12h升高均超过2倍。结论 UVB照射能引起MEF细胞存活率下降，且MEF 一的存活率在多个时间点 低于MEF “；p53基因对UVB照射后miR一465的表达具有负向调节作用。 【关键词】 中波段紫外线；p53；MEF；miR一465 Theinfluenceofp53onmiR一465inMEFcellsafterUVB irradiation． GENGJi—WU，GAOSu—zhen，ZHOU Mei-juan．DepartmentofRadiatonMedicine，SchoolofPublicHealthandTropicMedicine，SouthernMedicalUniversity， Guangzhou510515，China Correspondingauthor：ZHOUMei—juan．Tel：0086—20E—mail：fyzmj@163．com 【Abstract】Objective Tostudytheeffectsofp53ontheexpressionofmiR一465inMEFcellsafterUVBirradia— tion．M ethods Twocelllines，MEF “ andMEF 一 wereappliedforexperiment．Thegeneandproteinexpres— ， sionofp53wasassessed，withsubsequentobservationofthesurvivalrateandtheexpressionofmiR一465afterUVBirra— diationin50J／m ．Results Successfulp53silencewasconstructedinMEFp5一 ．Thesurvivalratesinbothcelllines wereremarkablyreducedsince2hoursafterUVBirradiation，withnorecovery24hoursafterirradiation．Significantlower ce11survivalwasobsenedinMEFP5一一thanthatinMEFp5 inmostexperimenttimepoints ． miR一465wasdown— regulatedinMEF~z。 atdifferenttimepointsafterUVBirradiation whileitwasup—regulatedinMEF~s一一atthecor． ， respondingtimepoints．Conclusion UVBradiationcancauseMEFcellviabilityimpairment，whichismoreprominentin MEFP5一 ． suggestingthatP53mayplayanegativeregulatio