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华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 轮状病毒感染胆管上皮细胞对 HMGB1 表达及释放的影响 研 究 生 邱银荣 导 师 冯杰雄 教授 华中科技大学同济医学院附属同济医院小儿外科 中文摘要 目 的：了解轮状病毒感染胆管上皮细胞对HMGB1 mRNA 表达及蛋白释放的 影响。 方 法：1. 体外培养小鼠胆管上皮细胞，设立对照组和实验组，实验组接种 轮状病毒，对照组接种等量病毒培养液，24 小时后免疫组化分析 HMGB1 表达。 2. 体外培养小鼠胆管上皮细胞，设对照组、病毒组、SiRNA 组，分 别于 12h、24h 、36h、48h 收集细胞和培养上清，RT-PCR 及 ELISA 分别检测胆管上皮细胞 HMGB1 mRNA 表达及培养上清蛋白表 达。 结 果：1. HMGB1 存在于正常胆管上皮细胞的胞核。 2. 病毒感染后胞核 HMGB1 含量较正常明显下降。 3. 12h、24h 胆管上皮细胞 HMGB1 mRNA 表达：病毒组表达较对照 组升高（P0.01 ），SiRNA 组表达较病毒组降低（P0.01 ）。 4. 36h、48h 细胞培养上清 HMGB1 浓度：病毒组 HMGB1 蛋白浓度 较对照组显著升高（P0.01 ），SiRNA 组较病毒组显著降低 （P0.01 ）。 结 论：1. 轮状病毒感染能引起胆管上皮细胞 HMGB1 mRNA 表达上调及胞 外 HMGB1 蛋白浓度升高。 2. SiRNA 干扰能有效抑制病毒感染引起的胞外 HMGB1 蛋白水平。 关键词： 轮状病毒，胆管上皮细胞，HMGB1 ，胆道闭锁 2 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 The expression and migration of HMGB1 in extrahepatic biliary epithelial cell after rotavirus infection Abstract Objective: To study the expression of HMGB1 mRNA and protein in extrahepatic biliary epithelial cells(EBECs) after the infection of rotavirus. Methods: 1. Compared the HMGB1 protein expression in HBECs with or without RRV infection by immunohistochemical staining in vitro. 2. Examined the protein and mRNA expression after viral infection with/without small interfering RNA targeting HMGB1(siHMGB1) transfection in vitro.The HBECs and supernatant were