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动物细胞融合和单克隆抗体教学案
动物细胞培养和单克隆抗体的制备
学习目标:
1、 举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。
学习重点:
1、单克隆抗体的制备和应用。
2、单克隆抗体的制备过程。
一、预习案
1、 动物细胞的融合
(1)概念:指 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程,也称为细胞杂交。
(2)结果:形成 细胞。
(3)过程:不同 的两个细胞 细胞。
(4)意义:克服了 杂交的不亲和性,成为研究 、 、
肿瘤和生物 培育的重要手段。
2、 单克隆抗体
(1) 抗体:由淋巴细胞(浆细胞)产生,成分为球蛋白,具有 。从血清中分离出来的抗体产量低、纯度低、特异性差。
(2) 单克隆抗体的制备
a. 过程
b.杂交瘤细胞的特点:既能大量 ,又能产生 。
c.单克隆抗体的特点: 强、 高、产量大。
二、探究案
小组讨论。(独立思考,合作共赢)
1、动物细胞的融合最有价值的应用是什么?细胞融合完成的标志是什么?
。
提醒:①若a和b两种细胞融合,则融合的方式有三种 、 和
。满足要求的为 ,所以融合后要筛选。
②动物细胞特有的诱导融合方式为灭火的病毒处理,其他的物理和化学方法在植物和动物细胞融合方面是通用的。
3、 单克隆抗体的确切定义是什么?
4、 制备单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞?在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞?
5、 制备单克隆抗体的过程有两次筛选,两次筛选的目的是什么?
第一次筛选是
第二次筛选是
三、提升案
1、单克隆抗体是指
A.单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B.单个淋巴细胞增殖产生的抗体
C.单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体D.单个抗体通过克隆,产生大量抗体
2、细胞合成DNA有D和S两种途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞由这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。骨髓瘤细胞尽管没有S途径,但能不断的分裂增殖,将这两种细胞在试管的培养液中混合,加聚乙二醇促融,再加入氨基嘌呤可筛选出某种细胞。在培养液中存在的细胞种类及筛选出的细胞分别是(细胞融合是仅考虑两个细胞的融合)
A.三种 杂交瘤细胞 B.五种 骨髓瘤细胞
C.五种 杂交瘤细胞 D.一种 杂交瘤细胞
3.(多选)将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合,可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体,其依据是
A.B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖B.淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体
C.骨髓瘤细胞可以无限增殖,但不能产生抗体D.骨髓瘤细胞可以产生抗体,但不能无限增殖
4.下列用动物工程技术获取单克隆抗体的实验步骤中,不正确的是
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞
B.用蛋白酶处理B淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞
C.用灭活的仙台病毒做诱导剂,促使B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体
5、结合单克隆抗体制备的流程回答下列问题。
① 技术是单克隆抗体技术的基础。
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