标记21和13号染色体双色FISH探针及其在快速产前诊断中的应用.pdfVIP

第 31卷 第 6期 中山大学学报 (医学科学版) Vol_3l No．6 2010年 I1月 JOURNALOFSUNYAT．SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) NOV． 2Ol0 标记21和 13号染色体双色FISH探针及其 在快速产前诊断中的应用 滕奔琦 ，章 钧 ，范建辉 ，尹玉竹 ，王 静 ，侯红瑛 H (中山大学 1．附属第三医院产科，广东 广州 ，510630；2．达安基因诊断中心，广东 广州，510080) 摘 要：【目的】采用细菌人工染色体 (BAC)克隆分别建立 21和 13号染色体的直标型荧光原位杂交(FISH)探针 ，并分 析其在产前快速诊断21／13号染色体数 目异常的可行性。 【方法】通过生物信息学网站挑选位于21q22．2(DSCR)和 13q14 (RB基 因)的BAC克隆，培养并提取 DNA后采用切 211平移法进行红／绿色 (21／13)荧光 的直接标记 。取上述探针与 中期细胞 进行杂交，鉴定探针的杂交位置。取 10例羊水标本分别采用标记的FISH探针 (实验组)与商品化探针 (对照组)进行检测，分 别计算探针的杂交率与准确率，采用随机化配对设计资料的t检验分析两种探针杂交效能的差异。取2008年 lO月至2010 年 4月期间，来我院行羊膜腔穿刺术的453例羊水标本作为实验组进行上述探针的FISH分析，同时对该 453例标本亦进行 细胞培养核型分析作为对照，并将两组检测结果进行比较 ，验证探针灵敏度 、特异度及阴、阳性预测价值。 【结果】采用BAC 克隆标记的FISH探针荧光信号清晰、明确，与核型分析对照位置吻合 ；杂交率及准确率与商品化探针相 比不存在统计学差 异；对453例羊水标本21／13三体进行检测的灵敏度为83．3％(5／6)，特异度为 100％(447／447)，阳性预测价值为 100％(5／ 5)，阴性预测价值为99．8％(447／448)。 【结论】采用BAC克隆标记建立的21／13号染色体直标型FISH探针荧光信号清晰、 明确．结果准确可靠、成本低廉 ，可以用于未培养羊水标本的产前快速诊断21／13j体综合征。 关键词：21三体综合征：13三体综合征 ：荧光原位杂交 中图分类号：R714．53 文献标志码 ：A 文章编号 ：1672—3554(2010)06—0884—05 Labelingofthe21and 13ChromosomalEnumerationDualColorFISH Probes andTheirEfficiencyinRapidPrenatalScreenoftheAneuploidy TENG Ben—qi，ZHANGJun，FANJian—hui，YINYu—zhu，WANG Jing，HOU Hong—yin’ (1．DepartmentofObstetrics，TheThirdAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510630，China； 2．DaanGeneDiagnosticCenter，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China) Abstract： 【Objective】 Toinvestigatethemethodsoflabeling21／13enumerationFISHprobesfrombacterialartificial chromosome(BAC)clonesandtheirefficiencyinrapidprenatalaneuploidyscreen．M【ethods】TwoBACclonesfrom21q22．2 (OSCR) and13q14werepickedoutfrom onlinebioinformaticsdatabasesandlabeledofred／greentoactasenumerationFISH probesofthechromosome2land 13． Thehybridizationpositi