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糖皮质激素对糖皮质激素受体和mRNA表达的调节作用
Chinese Journa of Pathophysio ogy 2002, 18( 3) : 243- 246 ∀ 243 ∀
[ ] 1000- 4718( 2002) 03- 0243- 04
mRNA *
刘宇健, 宋亮年, 卢 建
( , 200433)
[ ] : mRNA :
- ( RT- PCR) mRNA :
m RNA , mRNA ; mRNA
, :
,
[ ] ; RNA, ; ;
[ ] R335+ . 4 [ ] A
( human g ucocorticoid )
receptor, hGR) cDNA , 2
hGR ( isoform) , HOS- 8603 (
, 777 742 ) , 5% ( v/ v) DMEM
hGR( hGR) N ( Gibco BRL ) , 37 5% CO2
DNA C , ; 3AO
, hGR , 5% ( v/ v)
, , DMEM ;
hGR C [ 3]
( C 35 , 727 3 RT- PCR
15 hGR) , 31 寡聚核苷酸引物 hGRhGRcDNA
[ 1, 2, 6] , [ 2]
, hGRhGRcDNA
, , : 5 - CCTAAGGACGGT CTGAAGAGC-
[ 7]
hGRmRNA , 3 ; hGR 5 -
[ 8] GCCAGTCTTGGCCCTCTAT- 3 ; hGR
,
hGR 5 - CCACGTATCCTAAAAGGGCAC - 3
mRNA hGRhGR , 458 bp 366 bp
, , - (- MG)
hGRhGRmRNA ; 5 - ACCCCCACTGAAAAAGATGA -
, hGR 3 ; 5 - ATCTTCAAACCTCCATGATG -
3 , 104 bp
32 RNA 抽提 - -
[ 4]
RNA ,
1 RNA
F uka ; GeneAmp RNA PCR Kit 33 RNA 的逆转录 10
Perkin E mer Cetus ; - [ 32P] dCTP L: 5 mmo / L
( Promega
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