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高效液相色谱法在制药行业中的应用 --陈诗语 制药1081 1081604118 高效液相色谱法（HPLC）是20世纪70年代发展起来的一项高效、快速的分离分析技术已被广泛用于各个领域，它是以经典的液相色谱为基础，引入气相色谱的理论与实验方法，将流动相改为高压输送，并采用高效固定相及在线检测等手段，发展而成的分析、分离方法。以其灵敏度高、选择性好，可分析微量组成甚至痕量样品等特点，成为医药分析领域应用最广、发展最快的现代分析技术之一。有的已被列入药典，成为环境污染物检测技术及化工产品质量检验中的标准方法。 1．高效液相色谱的结构、原理和特点 高效液相色谱仪主要由色谱泵及控制器、进样器、色谱柱、检测器和数据处理及控制五大部分组成，分离原理是一个物理过程，流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱，利用不同物质在固定相上的保留时间不同，从而出峰时间不同而达到分离，利用保留时间定性，峰高或者峰面积定量，在将分离后的各个成分依次通过一紫外检测器时就可检测出各化合物的浓度来。 高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点： （1）高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。（2）高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。（3）高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。（4）应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。（5）分析速度快、载液流速快：较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30 min，有些样品甚至在5min内即可完成，一般小于1h。此外HPLC还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点。 2．高效液相色谱的研究应用进展 药物与人类的健康，生活质量的提高关系极大，许多药品由于受到纯度的影响，药效不能充分发挥，甚至产生毒副作用；有时服用前需作各种试验，带来很多麻烦。外消旋体药物是最典型的例子之一。它由左旋与右旋两种光学异构体组成，不同的异构体药理与疗效完全不同。以往由于分离与纯化能力的限制，市场上常以混合物即外消旋体出售。即使有少量的分离后的药物出售，价格也极为昂贵，目前美国FDA（食品和药品管理局）和西方许多国家的有关部门都已作出了禁止外消旋体药物在市场上销售的决定，必须把它分离成单一的左旋或右旋体才能作为产品上市。所以药物产品对分离与纯化技术提出了更高的要求。色谱是目前分离与纯化领域中处理多组分复杂体系的最有效的方法，在各种色谱技术中，HPLC又是分离与纯化药物的最佳选择。 2.1高效液相色谱在检测药物含量上的应用 在药物分析中，高效液相色谱由于其专一性，灵敏度高，快速简便的特点，广泛的应用于药物分析中的定量分析，尤其在干扰因素较多的时候表现出更大的优越性。关日晴采用高效液相色谱法测定盐酸洛美沙星滴眼液中的洛美沙星含量；用C柱为分离柱，0.02tool/nm 酸溶液(用三乙胺调节pH值至2.6)-乙腈(体积比85:15)为流动相，检测波长287nm；洛美沙星进样量在0.48～0.72 g范围内与峰面积线性关系良好(r-0.9998)，平均回收率100.4,重复进样的RSD0.33 (n-6)。张 敏等在用高效液相色谱法测定清热丸中黄芩苷的含量中 此外国内还对喹诺酮类抗菌药n、复方阿莫西林粉中阿莫西林和克拉维酸口 、复方感冒液、芩连口服液中黄芩苷口、氢溴酸右美沙芬片、饲料中氯羟吡啶、注射用硫酸奈替米星、小诺霉素中C2b、保健食品中的西地那非和西力士、植物愈伤组织中的喜树碱及其衍生物、饲料中十三种磺胺类药物等药物的测定进行了研究。在利用高效液相色谱法进行测定与其他技术联用，检测器一般有紫外分光光度计，质谱等。这些精密的检测器决定了分析的灵敏度，对于分析起着重要的重要，是高效液相色谱分析法中重要的组成部分。 2.2高效液相色谱在药效检测上的应用 高效液相色谱法能同时进行分离和定量测定的优点在治疗药物检测和药物代谢动力学中体现地尤为突出。药物的治疗效果与其及其代谢物在血液中的浓度有关。治疗药物通过一段时间的使用后，在体内还有一定的残留，同样会影响人的某些生理功能，因此进行体内药物残量分析也成为近年来新药效能研究的主要内容。从高效液相色谱法的发展趋势来看，高效液相色谱在仪器、检测器、固定相等方面有了很大的发展，这为高效液相色谱法的广泛应用打下了坚实的基础。每一种分析技术均有其使用范围和方法的局限性，将单一色谱技术联用能获得更大的发展。尤其是色谱一色谱联用、色谱一光谱联用、柱切换技术、高效液相色谱一质谱连用、高效液相色谱，傅立叶变换红外吸收光谱联用等。高效液相色谱与其它先进技术联用，将是高效液相色