细胞周期细胞凋亡-抗体.ppt

产品编号 产品名称 包装规格 品牌 9665S Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb 100ul CST 9664S Caspase-3 (8G10) Rabbit mAb? 100ul CST 细胞凋亡之caspase-3 细胞凋亡之 caspase-3 Jurkat T-Cells 6 μM camptothecin for 4 h untreated Jurkat T-Cells Mouse Thymocytes 细胞凋亡之 caspase-3 固定、破膜过程 产品编号 产品名称 包装规格 品牌 9602S Cleaved Caspase-3 (Asp175) Rabbit mAb (Alexa Fluor??647 )? 100ul CST 269518 Human/Mouse Cleaved Caspase?3 Alexa?Fluor??488 Antibody 100tests RD 550821 PE Rabbit Anti- Active Caspase-3 100tests BD 细胞凋亡之 caspase-3 通过酶和底物显色进行Caspase酶活检测试剂盒 4细胞凋亡之 核内DNA事件 凋亡晚期特征 DNA内切酶活性被激活升高，双链DNA在核小体之间切断形成~185bp为基数的有序片段。 检测方法 Tunel流式法:通过在核酸片段末端标记优势计算凋亡百分比 末端转移酶标记技术 细胞凋亡之 核内DNA事件 原理： TdT: 脱氧核糖核苷酸末端转移酶 dUTP:三磷酸脱氧尿甘 细胞凋亡之 核内DNA事件 通过DNA末端转移酶将带标记的 dNTP （多为dUTP）接到DNA片段的3’-OH端，再通过酶联显色或荧光检测定量分析结果。 通常检测方法：FCM IHC Tunel方法 一步法 实验用2种染料 PI染色总DNA：得到细胞周期的信息； FITC-dUTP染色凋亡细胞：检测凋亡。 在流式细胞仪488nm激发下，PI发射约623nm荧光，FITC发射520nm荧光。 Tunel方法 二步法 PI染色检测细胞周期 FITC染色检测凋亡 （如果不需要周期信息，则可不做PI染色步骤） * 产品编号 产品名称 包装 规格 品牌 应用 方法 4812-30-K TdT In Situ Apoptosis Detection Kit - FITC 30T RD FCM 556405 Apoptosis Detection Kit (APO-BRDU) 60T BD FCM 4810-30-K TdT In Situ Apoptosis Detection Kit - DAB 30T RD IHC K403-50 ApoBrdU-IHC DNA Fragmentation Assay Kit 50T Biovision IHC 核内DNA事件之 明星产品 不同时期凋亡的检测指标的选择 早期：Annexin V 早中期：Cytochrome C 和线粒体相关 中晚期：Caspase-3, 8, 9, other proteins 晚期：DNA Fragment 流式图结果正确？修改 * 对应产品 * CST的产品 * Caspase挂图 * WB产品 * IHC产品 * 流式产品 * 细胞周期的概念 * 流式图解读，重要参数 * 添加特色产品介绍 * 细胞生命活动之 --细胞凋亡、细胞周期 细胞凋亡（ Apoptosis）概念 为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序死亡。是机体主动、高度有序清除无用细胞过程。是生物体中一种普遍存在的现象。 与细胞坏死 (Necrosis) 相区别，坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程。 细胞凋亡生理意义 ? 蝌蚪尾的消失 ?脊椎动物的神经系发育 约50%细胞凋亡 ?发育过程中手和足形成 蹼消失 细胞凋亡与疾病 细胞增殖 细胞凋亡 生与死的平衡 癌症 自身免疫 长期感染 I型糖尿病 神经退行性疾病：老年痴呆、帕金森氏症、亨廷顿氏症等 心肌梗塞 艾滋病 细胞凋亡多事件发生 1 细胞凋亡之细胞膜事件 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)是一种细胞膜活性物质，正常细胞中，其位于细胞膜脂质双层内侧,在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面。 细胞凋亡之细胞膜事件 早期凋亡特征： 磷脂膜(PS)外翻，但是细胞膜保持完整性，因此PI染色为阴性 DNA没有