重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达.pdfVIP

实用匿望鍪查 11年箜 !鲞 939 · 基 础 研 究 · 重组人 pEGFP—C2一NPHS2表达载体的构建及 其在人胚胎 肾293细胞 中的表达 沙玉根 赵非 张爱华 黄松 明 摘要 目的：构建人pEGFP—C2一NPHS2表达载体，并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法： 应用基因重组技术．构建增强绿色荧光蛋 白与NPHS2的融合表达载体 ，经PCR、限制性 内切酶酶切和测序 鉴定 ，应 用基 因转染技术将 其转入 HEK293细胞 中，荧光显微镜和免疫印迹检测 NPHS2的表达产物 D0docin 结果：经鉴定 目的基 因NPHS2全长插入重组质粒 ，HEK293细胞不表达 NPHS2基 因，转染后可以检 测到绿 色荧光蛋 白分布于细胞 的膜周部，免疫 印迹证实为编码蛋 白podocin