文献翻译新型腺病毒基因载体的构建与评价药学院药学0702张航俊.docVIP

本 科 生 毕 业 论 文（设计） 外 文 翻 译 题目 腺病毒逆转录酶病毒混合载体实现体内肿瘤转导抗肿瘤效腺病毒逆转录酶病毒混合载体实现体内肿瘤转导抗肿瘤效Shuji Kubo1,2, Kazunori Haga2,*, Atsuko Tamamoto1, Donna J Palmer3, Philip Ng3, Haruki Okamura1 and Noriyuki Kasahara2,4 基于鼠白血病病毒，选择性，持久性肿瘤传导从而多种癌症治疗为了进一步这一的效率我们已经开发出一种传送方式腺病毒(AdRCR)。这样一来，腺病毒载体介导的肿瘤细胞现场细胞正如高效价AdRCR的转导水平都显著高于原来的RCR载体本身始转导水平RCR的复制动力学。基因活化剂药高AdRCR结合治疗的效果比依靠剂量的单一RCR组有显著提高。通过这个我们可以发现，AdRCR混合载体不仅能够提高腺病毒生产效价并且能直接在原位二次产生RCR，还可以显著地提高以RCR为介导的前药活化基因治疗。 简介 溶瘤病毒治疗最近，我们和其他人已经表明鼠白血病病毒作为病毒治疗剂特色贯穿全固体肿块高选择性感染和稳定的基因转移在接种后最初多重感染（）0.01。酵母菌胞嘧啶脱氨酶(CD)5氟胞嘧啶（5 -）基因活化整合残余癌细胞作为一个长期的病毒的进一步传播甚至转移部位。在定期的时间间隔达到100％存活率一个RCR介导的基因治疗药激活患者复发性脑胶质瘤临床试验美国食品和药物管理局在人类多种肿瘤细胞株双向性广宿主物种取向MLV-based RCR能以方式对数迅速传播的然而，在某些如乳腺癌MDA - MB - 231和MDA - MB - 435乳腺癌，子宫颈癌HeLa细胞癌，神经胶质瘤细胞Gli36人类细胞系，在体外增加RCR的初始投入由于低滴度逆转录病毒生产的特点，快速繁殖初始转导进人体临床试验研究为了解决这个问题我们最近开发的依赖腺病毒（HDAd新型复合载体腺病毒中，所有的编码序列被完全删除因此，有高达36 KB的克隆完整逆转录病毒慢病毒载体反转录转座子载体编码序列HDAd能够作为第一阶段载体，用以编译RCR，这样就能够在腺病毒感染的细胞以前，我们及测试的HDAd 嗜亲性鼠种特异性绿色荧光蛋白(GFP)人类腺病毒5型为基础的HDAd能感染人类和小鼠细胞但只有短暂嗜亲性的因此，根据具体物种的差异取向高滴度的腺病毒永久性反转录病毒的特点然而，采用这种策略可能提高体内的基因转移效率，从而增强本基因治疗效果癌症模型中的相关实验能够感染人类癌症细胞AdRCR混合载体。这份报告还表示AdRCR载体RCR，治疗性基因我们的研究结果表明，高滴度HDAd初始转导的优势，加速复制传播可以达到增强。 RCR杂交载体（Ad）设计和验证7.0 × 109 到 3.8 × 1010单位每毫升。其具体表达动力学过程如图1（d）所示。 RCR在转换为AdRCR后在体外生产和传播的动力学研 图2体外Adrcr感染后RCR的产生和传播 通过连接Adv而达到原位二次产生生产的RCR组与每天从培养基中提取的AdRCR-transduced MDA-MB-231细胞作比较。显著地原位二次产生组RCR比后者出现并且达到高滴度（图2a所示）。 然后AdRCR-GFP与RCR-GFP作比较，比较其表达效率。其结果如图2b所示，AdRCR拥有更快的体内动力学传播水准，其在第9天达到了82.4 ± 5.2%的水平而RCR组达到了36.9 ± 3.2% 体内AdRCR介导人类异种移植皮下乳腺癌Adrcr介导的基因转移AdRCR-GFP 瘤内注射到 MDA-MB-231产生的肿瘤中后，GFP和β-半乳糖激酶AdRCR-GFP 和RCR-GFP后GFP的表达。 体外药物激活基因对Adrcr转染细胞的杀灭作用 图4体外RCR药物激活基因对Adrcr感染细胞的杀灭作用 图4a为 AdRCR-CD转染后 MDA-MB-231的细胞活力以及RCR的二次传播。图4b为细胞活力与β-半乳糖激酶的表达水平。 讨论 腺病毒可高滴度，腺病毒生物学一致第一阶段HDAd AdRCR混合载体系统不止显著加强初始感染效率，并能够显著加强第二阶段的RCR的传播动力学，特别是瘤内注射后在腺病毒容易实现高滴度剂量依赖性值得注意的是MDA-MB-231瘤内注射的RCR载体，其复制能力十分低下，表现为只能在给药时段短暂抑制肿瘤生长。这表明在10天内对固体瘤5%的杀灭率是由RCR-CD完成的（与AdRCR-GFP研究一致），在未感染肿瘤细胞旁观者效应的CD/5-FC基因治疗AdRCR-CD进行前药治疗使肿瘤细胞完全的复原。虽然即使直接瘤内注射高滴度腺病毒AdRCR-GFP体内注射8天后其转染水平最多只到20%平均大概8%左右。相反，这些结果表明