样本寄送指引-青莲百奥.DOC

青莲百奥样品收集和寄送指南 寄送标准 寄送温度 胶条样品：冰袋环境； 组织、菌体、细胞沉淀、血清、培养基上清和蛋白提取液：样品收集好后立即置于液氮中冷冻5 min，－80℃保存，所有样品收集好后干冰环境寄送； 细胞：冻存细胞干冰寄送；培养中的细胞需保证状态良好，培养瓶中装满培养基，常温寄送； 寄送样品时附上填写完整的纸质版样品信息单（务必包含样品物种拉丁名及数据库、样品标识名称，管数，分组对比信息）。 样品标记清晰明确，与样品信息单中保持一致，不同项目的样品量参考如下所述 蛋白混合物鉴定 优先考虑客户提供考马斯亮蓝染色有明显条带的胶条样品，如银染样品则不能用戊二醛染色。建议上样量为20 ng~2 μg，保证全部蛋白都跑进分离胶，严格沿染色条带大小切下蛋白样品装入1.5mL EP管中，一般不要超过1 cm2，不要切取没蛋白条带的多余胶。 客户若只能提供IP洗脱液，则属于非常规项目要进行额外处理，需提供IP洗脱液成分的详细信息，项目周期延长1周。 单蛋白修饰鉴定 优先考虑客户提供考马斯亮蓝染色有明显条带的胶条样品，且单蛋白纯度为80%以上。 单蛋白泛素化修饰鉴定，切取目的蛋白和目的蛋白以上至浓缩胶的全部分离胶作为样品；如是抗体纯化的单蛋白，则需将抗体重链和轻链去除。 客户若只能提供IP洗脱液，则属于非常规项目要进行额外处理，项目周期延长1周，需提供IP洗脱液成分的详细信息和目的蛋白分子量，需提供WB验证后的蛋白实际分子量。 iTRAQ/TMT/二甲基标记定量蛋白质组学 最好送原始样本，除非客户有成熟的蛋白质组学的蛋白提取方法。 动物组织样品：湿重不少于200 mg，样品不能溶血，取材后用PBS冲洗3遍去除血液污染。 植物组织样品：湿重不少于1 g，取材后用PBS冲洗3遍去除杂质污染。 菌体样品：原则上只接受常见无毒菌的菌体样品，菌体沉淀不少于100 mg或者体积不少于100 μL；若为含有毒菌的菌体样品或菌体裂解液，按照《病原微生物技术服务操作指南》执行。 细胞样品：收集细胞沉淀，PBS冲洗3遍，送样量为5×106或细胞沉淀不少于50 μL。 培养基上清液：需保证无菌体或细胞（用0.2 μm膜过滤），有条件可浓缩后再寄送；送样体积不少于10 ml。 血清样品：新鲜血液取出后，4℃，2000 g，离心15 min，取上清，即得血清；血清制备过程中保证不能溶血；血清体积要求不少于500 μl；制备血清过程中，客户可根据自己的样品和实验要求选择是否添加抗凝剂，一般不用添加。 若客户直接提供蛋白，则蛋白量不少于1 mg，浓度不低于2 mg/mL。 SILAC定量蛋白质组学 客户提供的细胞系使用的培养基需符合公司现有SILAC培养基类型： 1640/DMEM/MEM；若非这三类培养基的细胞系，需提前查阅是市面是否有SILAC培养基。 客户可自行提供细胞系：冻存细胞干冰环境寄送；状态良好的在养细胞，培养瓶中装满培养基，常温寄送。 如客户自己培养的细胞：需做好标记效率检测，收集细胞沉淀，PBS冲洗3遍，送样量为5×106或细胞沉淀不少于50 μL。 若客户直接提供蛋白，则蛋白量不少于1 mg，浓度不低于2 mg/mL。 定性修饰组学 最好送原始样本，除非客户有成熟的蛋白质组学的蛋白提取方法。 动物组织样品：湿重不少于500 mg，样品不能溶血，取材后用PBS冲洗3遍去除血液。 植物组织样品：湿重不少于5 g，取材后用PBS冲洗3遍去除杂质污染。 菌体样品：原则上只接受常见无毒菌的菌体样品，菌体沉淀不少于1 g或者体积不少于500 μL；若为含有毒菌的菌体样品或菌体裂解液，按照《病原微生物技术服务操作指南》执行。 细胞样品：收集细胞沉淀，PBS冲洗3遍，送样量为5×107或细胞沉淀不少于500 μL，磷酸化修饰定量送样量为2×107或细胞沉淀不少于200 μL。 若客户直接提供蛋白，则蛋白量不少于20 mg，组蛋白不少于 mg，尽量提供蛋白干粉，磷酸化修饰蛋白量为不少于10 mg，浓度不低于2 mg/mL。 iTRAQ/TMT/二甲基标记修饰定量组学 最好送原始样本，除非客户有成熟的蛋白质组学的蛋白提取方法。 动物组织样品：湿重不少于500 mg，样品不能溶血，取材后用PBS冲洗3遍去除血液。 植物组织样品：湿重不少于2 g，取材后用PBS冲洗3遍去除杂质污染。 菌体样品：原则上只接受常见无毒菌的菌体样品，菌体沉淀不少于300 mg或者体积不少于300 μL；若为含有毒菌的菌体样品或菌体裂解液，按照《病原微生物技术服务操作指南》执行。 细胞样品：收集细胞沉淀，PBS冲洗3遍，送样量为5×107或细胞沉淀不少于500 μL；磷酸化修饰定量送样量为2×107或细胞沉淀不少于200 μL。 若客户直接提供蛋白，则蛋白量不少于5 mg，组蛋白不少于 mg