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重新认识网织红细胞参数的临床价值 中华血液学杂志?2014-03-06? HYPERLINK javascript:void(0); 发表评论? HYPERLINK javascript:void(0); 分享 网织红细胞（reticulocyte，Ret）是未完全成熟的红细胞。Ret 计数是反映骨髓红细胞生成的重要指标之一，在贫血的诊断和监测骨髓对治疗的反应方面具有重要的临床价值。随着自动血细胞分析仪和流式细胞术的普及和发展，Ret 分析的参数种类增多，精确度也日渐提高。 然而，很多临床医师对一些新的Ret 参数尚不熟悉，部分医院血细胞自动分析报告单中仅给出Ret 百分比，未包括Ret 绝对值和未成熟Ret 分数等参数。因此，有必要对Ret 的临床意义进行回顾和重新认识。 一、Ret的生成 Ret 是介于有核红细胞和成熟红细胞之间的一种过渡形式的未成熟红细胞，约占循环红细胞总数的1%，因细胞内残存的核糖体RNA经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后在显微镜下呈网状而得名。 骨髓中红系增生的过程受到许多造血生长因子的调控，其中最重要的是红细胞生成素（EPO）。大约在Ret 离开骨髓的前3 d，晚幼红细胞脱核形成Ret，因此Ret 在骨髓停留2~3 d、外周血停留1 d 后变为成熟红细胞。 早年Heilmeyer 依据活体染色细胞内网状结构的量将Ret 成熟度分为0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期，在正常情况下，外周血96%以上Ret 为Ⅲ、Ⅳ期成熟度。自动血细胞分析仪依据细胞内染色的RNA含量确定Ret 成熟度，比较客观。 未成熟Ret 分数（IRF）是指未成熟网织红细胞与总网织红细胞的百分比。早期的Ret 内含有线粒体、少量的核糖体以及高尔基体残体，仍具有合成血红蛋白的能力，红细胞中血红蛋白总量的20%~30%是在这个时期合成的。 随着Ret 的成熟，其合成血红蛋白的功能逐渐消失，细胞膜表面也发生了变化（转铁蛋白受体消失等）。 二、Ret计数与报告方式的评价 1. 显微镜下人工计数： 通过活体染色细胞胞质的RNA，依据形态学特征确定Ret。这种方法具有一定的局限性，受操作方法、涂片质量、染色质量、观察者变异等许多因素的影响。一般正常人的标本至少需要计数1 000个红细胞。当Ret较低时，需要计数更多的红细胞才能保证准确性。 2. 血细胞自动分析仪计数： 血细胞自动分析仪提高了检测速度，同时避免了人工操作产生的差异性，精确度比人工计数提高了10倍以上。同时，Ret的分析由单纯的Ret计数扩展到IRF和Ret血红蛋白含量（CHr）等更多的参数。 新型的血细胞自动分析仪采用流式激光技术和荧光染色技术测量Ret胞质内的RNA含量，并根据细胞内RNA与试剂中的荧光染色剂结合后发出的荧光强度，将Ret分为高荧光强度Ret（HFR）、中荧光强度Ret（MFR）和低荧光强度Ret（LFR），并计算IRF［IRF =（HFR+MFR）/ Ret］。 IRF 值与RNA含量和Ret 幼稚程度呈正相关，能更好地反映骨髓红系的造血功能。当造血系统受到刺激后，较多的Ret（甚至是幼稚的红细胞）从骨髓释放到外周血中，导致MFR、HFR、IRF 明显增高。 因此，IRF 为评估Ret 成熟度的参考指标。其正常参考值因仪器设备而异，一般为5%~22%。Ret 血红蛋白含量（CHr 或Ret-He）是Ret 体积和Ret 血红蛋白浓度的乘积，西门子血细胞分析仪检测结果为CHr，希森美康血细胞分析仪检测结果为Ret- He。 CHr 通过两个角度的散射光测得，Ret-He 则是通过前向散射光测得，两者成正比例关系。CHr与血红蛋白值相关性更好，受分娩、炎症等影响较少，可以即时反映红细胞内功能铁的水平，且Ret 在循环中只存在1~2 d，所以可早期反映体内功能铁的含量和铁贮备。CHr正常参考值为28~35 pg，Ret-He 正常参考值为1630~1860 AU。当有较多的有核红细胞或核碎片出现在外周血中时，血细胞自动分析仪的检测精度会下降，此时应使用人工计数。 3. 流式细胞术检测： 激光束可射入细胞内，显示荧光染色后的网状结构和RNA含量，据此将Ret分成不同成熟程度的三群（HFR、MFR和LFR），荧光强度越高，说明Ret 越幼稚。 但流式细胞仪和试剂价格昂贵，而且不同型号流式细胞仪的荧光灵敏度、分辨率不同，不同实验室检测结果的可比性较差，这些因素限制了流式细胞术在Ret 检测中的应用。 4. 报告方式的评价： 建议同时报告Ret百分比、Ret 绝对值、HFR、MFR、LFR、IRF、CHr。影响外周血Ret计数的因素有两个：Ret 释放入外周血的速度和外周血中Ret 的成熟时间。 在贫血或红系造血受刺激时，Ret 会过早从骨髓释放，在外周血中的成熟时间延长，这时应该用红细胞