气相色谱法在2010版《中国药典》中应用.pptVIP

气相色谱法（GC）在2010版《中国药典》中的应用;检测器;一、气相色谱仪的配置;柱子的选择（填充柱和毛细管柱） 根据标准要求购买，购买的时候明确柱子型号最好，毛细管柱主要为聚硅氧烷类和聚乙二醇类。开发新方法时，首选非极性固定相，柱效高，对氧不敏感、最高使用温度高、柱寿命长优点。 检测器 标配为ＦIＤ（大多数有机化合物）/TCD（微量水分测定）和ＥCD（有机氯农残）。氮磷检测器（有机磷农药残留方法已被05药典附录收载，但具体品种的检验尚未开展） 工作站：厂家自带工作站，可要求厂家安装。N2000。 通化师范学院有气相、顶空、分流、农残检测器，药典标准要求的气相条件已完全具备，可以委托做样和开发方法。 ;仪器标准配置;需要购买仪器的情况 无气相色谱仪：一般为委托检验。 建议：根据样品和药典、局颁标准和企业标准按标配配齐，节省成本。 现有标准无法满足标准要求如有GC，未配置分流不分流进样口和顶空、ECD， 建议：对仪器进行升级。 任务重，GC不够用。建议：买同型号（可替换）或不同型号（方法学验证）均可。;二、合格的GC操作者应具备的知识;3.使用性能可靠的二级减压阀（氧气表） 。气体发生器不需要，一般需药厂自己准备好，避免工程师调试的时候无法安装，要求高，一般在外地购买，氧气表右边的表显示钢瓶气体压力，左边表显示减压输出后气体压力。 4.定期更换气体净化器填料（气源与仪器之间，配ECD检测器最好配置）变色硅胶变红时需要活化，140℃加热2h。分子筛等吸附有机物的净化器就不好用肉眼判断了，须定期更换。空气压缩机有机杂质高一些，最好3个月更换一次，马福炉400~600加热4-6h。 ;5.会测定气体的流速和计算分流比 气体的流速单位一般用mL/min表示，一般用皂膜流量计测定。氢气的流速30-40之间，空气的流速一般在300-400之间，载气的流速根据样品和色谱柱的种类决定，测完氢气、空气、尾吹气的流速减掉载气流速。隔膜吹扫（用途）一般是1。尾吹气（用途）是20-30之间。分流出口流量根据需要测定。分流比=（分流出口流量+柱流量）/柱流量。氮气：氢气：空气=1:1:10FID灵敏度最高。 6.进样口的维护 能更换进样口隔垫、清洗进样口衬管（玻璃毛）、衬管上端的O形硅橡胶密封圈、清洗分流平板。;;7. 及时清洗注射器，取样的时候会排气泡，注射速度越快越好，且每次注射的过程重现性要好，取样之前用溶剂洗3次（每次抽满2/3），样品溶液洗3次，然后取样。 8. 会更换柱子（插入进样口和检测器的深度，用换下的隔垫插到柱子上。换下的柱子堵上盲堵，第一次没有方向，一般让牌子从正面看到，用过一次就有方向）。 ;柱子安装 进样口端①使色谱柱穿过垫圈伸出4-6mm，把隔垫向上滑到柱螺帽②将柱插入进样口，把柱上的螺帽和垫圈向上滑到进样口底部，用手拧紧柱螺帽至柱固定，调节色谱柱的位置，使柱上隔垫正好在柱螺帽底部③扳手拧紧1/4-1/2圈。 检测器一端：将柱螺母和垫圈插入到检测器接头底部，接头用手拧紧，再将柱子下拉1mm，扳手拧紧-1/4圈，检漏。 （液相柱区别）;切割柱子、切割铜管，及时更换毛细管柱密封垫。安装完色谱柱做泄露检查，尤其是连检测器的一端。准备一份色谱柱测试标样，做柱效测定，看色谱柱是否合格以及确定问题是否在色谱柱。柱子牌子信息：长度、内径、固定液厚度、温度范围。柱子的老化（40℃-50℃/10℃/min→升至最高使用温度2-3h，不连接检测器，不用氢气作为老化载气。何时老化？新柱子和长时间未用的柱子或色谱峰异常）。老化目的除去填充物中残留挥发性成分，并使固定液再一次均匀牢固地分布在载体表面上。;9.检测器的维护 点火线圈的更换、喷嘴的清洗、注意不要烫伤。开机先开载气，检测到柱子流量后再升温，否则将破坏柱子和检测器。FID检测器温度达到150度才能点火，判断是否已经点着火。关机是先关氢气和空气，再降温度，最后关载气（保护检测器和柱子）。热导检测器注意通电之前，确保载气通过了检测器，否则，铼钨丝易被烧断。关机先关检测器电源，然后关载气。注意铼钨丝易被氧化。电子捕获注意放射性危害，不允许自己拆卸，厂家工程师或专业人员，ECD出口排到室外。;10.会数据处理 内标法（内标校正因子法和内标工作曲线法） 可消除进样量不准确误差，GC进样量一般为1uL，液相是10uL、20uL，GC更易出现进样误差，自动进样器准确度可满足要求，手动进样最好用内标法定量。需要内标物。 ;;对照品溶液得标准曲线AR/AS=aCR+b，将Ai/As代入曲线计算。 得标准曲线：工作站、计算器、EXCEL;外标法（外标一点法和工作曲线法）;面积归一化法;硬脂酸镁中硬脂酸含量、大豆油（供注射用）;