高中生物选修1《专题5 DNA与蛋白质技术》复习.ppt

专题5 DNA和蛋白质技术;;2.PCR的反应过程 一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性→复性→延伸三步。学.科.网 zxxk. 3．PCR技术反应过程中控制不同温度的意义 (1)90 ℃以上时变性，双链DNA解聚为单链； (2)50 ℃左右时复性，两种引物与两条单链DNA结合； (3)72 ℃左右时延伸，TaqDNA 聚合酶促使DNA新链的合成。;【例】　关于DNA的复制，下列叙述正确的是(　　) A. DNA 聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的5′端延伸DNA 链 B. DNA 复制不需要引物 C. 引物与DNA 母链通过碱基互补配对进行结合 D. DNA 的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸 【答案】C;1．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般要经历30多次下述循环：95 ℃条件下使模板DNA变性、解链→55 ℃条件下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃条件下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述，不正确的是(　　) A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比，其所需要酶的最适温度较高;二、DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理 (1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低； (2)DNA不溶于酒精溶液； (3)DNA不被蛋白酶所水解；学.科.网 zxxk. (4)DNA可被二苯胺染成蓝色。;2．方法目的; (1)哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 (2)实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。;【例】　下表是关于“DNA粗提取与鉴定”实验中所使用的材料、操作及其作用的表述。正确的是(　　)学.科.网 zxxk.;1. 实验中共3次过滤。过滤时使用的纱布层数与取其滤液或黏稠物有关。第1、3次要收集其滤液，使用的纱布为1～2层，第2次要收集其滤出的黏稠物，使用的纱布为多层。 2. 实验中有6次搅拌，除最后一次搅拌外，前5次搅拌均要朝向一个方向，并且在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步搅拌均要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，以防止DNA分子断裂。 3. 实验中有两次使用蒸馏水。第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂；第二次加蒸馏水是为了稀释NaCl溶液使DNA析出。 4. 用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度的溶解使DNA析出，能除去不能溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 5. 最后析出DNA必须使用冷酒精(至少在5℃以下存放24小时)，并且将1份含DNA的NaCl溶液加入到2份的冷酒精中。如果悬浮在溶液中的DNA丝状物较少，可将混合液放入到冰箱中再冷却几分钟。;1. (改编)在DNA分子的粗提取实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是(　　) A. 稀释血液、冲洗样品 B. 使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C. 使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D. 使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA 【答案】B ;2．(2010年青岛模拟)下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是(　　) A．氯化钠的浓度越低，DNA的溶解度越大 B．人的血液不可代替鸡血进行该实验 C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 D．利用DNA易溶于酒精的特点可除去DNA中的部分杂质;3．向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是 (　　) A．减小；减小　　　 B．增大；增大 C．先减小后增大；增大 D．减小；增大;三、血红蛋白的提取和分离 1．方法及原理;2.实验操作程序 (1)样品处理 ①红细胞的洗涤：除去血浆蛋白等杂质，以利于后续步骤的分离纯化； ②血红蛋白的释放：使红细胞涨破，血红蛋白释放出来； ③分离血红蛋白溶液：经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来，便于下一步对血红蛋白的纯化。; 相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，而相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，移动速度快，因此蛋白质分子彼此分离。;4．(2009年南京质检)下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是 (　　) A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白质与其