酿酒酵母转化生成2-苯乙醇分批补料工艺优化.pdfVIP

第 10卷第4 期 过 程 工 程 学 报 Vol.10 No.4 2010 年 8 月 The Chinese Journal of Process Engineering Aug. 2010 酿酒酵母转化生成 2-苯乙醇分批补料工艺优化 王 航， 董清风， 孟 春， 石贤爱， 郭养浩 (福州大学生物科学与工程学院，福建 福州 350108) 摘 要：对酿酒酵母转化生成 2-苯乙醇过程的碳氮源进行优化，选择葡萄糖为碳源，1 g/L 脲为氮源，8 g/L L-苯丙氨 酸为前体，以呼吸商达 1.1±0.1 为补糖控制依据，在 5 L 发酵罐水平建立分批补料工艺，2-苯乙醇终浓度达 4.39 g/L ， 生成速率达 0.314 g/(L⋅h) ，L-苯丙氨酸摩尔转化率为 0.8，L-苯丙氨酸残留浓度仅为 0.634 g/L. 关键词：2-苯乙醇；酿酒酵母；呼吸商；分批补料培养；优化 中图分类号：Q815 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2010)04−0767−05 Eshkol 等[5]筛得一株耐高温酿酒酵母，以离线检测的发 1 前 言 酵液中葡萄糖浓度为反馈指标建立分批补料工艺，PEA 2-苯乙醇(2-Phenylethanol, PEA)又名β-苯乙醇，是 终浓度达 4.5 g/L ，为迄今报道的分批补料工艺最高水 一种具有玫瑰花香的芳香醇，大量应用于日用化学和食 平，然而其 PEA 生成速率仅为 0.065 g/(L⋅h). 本工作通 品工业，是化妆品中用量最大的玫瑰香型成分. 目前， 过优化 PEA 发酵过程碳氮源种类和浓度，在 5 L 罐水平 绝大部分 PEA 采用化学方法生产，常含一些对人体有 建立以呼吸商(Respiratory Quotient, RQ)为反馈信号的 害而又难以除去的副产物. 随着生活水平的提高和对健 补料分批培养工艺，以获得较高 PEA 产量和生成速率. 康的关注，人们越来越重视食品的安全性，更崇尚绿色 2 实 验 和天然. 各国法律对化学合成的添加剂限制更严格，食 品和化妆品的生产越来越倾向于使用天然产物. 目前在 2.1 材料 [1] 国际市场上，天然 PEA 比化学合成的贵 100 倍以上 . 2.1.1 菌种及试剂 以酵母为催化剂，对天然 L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine, 酿酒酵母 R-UV3 为本实验室选育[3]. 2-苯乙醇标准 L-Phe)进行生物转化是生产天然 PEA 的有效途径. 品购自比利时 Acros Organics 公司，L-Phe 标准品购自 PEA 对酵母有较强的抑制作用，为最终实现 PEA 美国 Alfa Aesar 公司. 培养基中底物 L-Phe 购自福建麦 工业化发酵生产，往往需经耐 PEA 菌种选育[2−6] 、分批 丹生物集团有限公司. 其他试剂均为分析纯. 培养过程优化[7−10] 和利用原位产物转移技术(In situ 2.1.2 培养基 Product Removal, ISPR)[11−14]最终解除 PEA 抑制等过程. 种子培养基(g/L) ：葡萄糖 20 ，蛋白胨 20 ，酵母浸 本课题组已选育得到一株高产 PEA 的酿酒酵母 粉 10. R-UV3[3]. 为更好实施 ISPR